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刘曦lxlx

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助,SDS-PAGE电泳跑不出条带!已有4人参与

本人正在做蛋白提取纯化,总蛋白过镍柱用咪唑洗脱后,分管收集,用BCA法检测各管蛋白含量,吸光值挺高的,颜色变化也很明显,取这些吸光值高的样品去跑SDS-PAGE电泳,却没有条带!?只能看到marker,可以肯定制胶和用的试剂都没问题,求问有大神知道怎么回事吗????

求助,SDS-PAGE电泳跑不出条带!


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快乐的大脚

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
推测 1考马斯亮蓝时间太久了 染色效果不好 建议重新配制  2蛋白含量太低 或者上面实验有问题没有蛋白 建议增加正对照 就是肯定能跑出来的蛋白 排除配胶 染色等问题 3蛋白含量太低脱色时间不够  联系二脱 再脱色干净一点 看看

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4楼2017-12-02 09:51:12
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feixieliuli

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
换个方法测蛋白浓度,然后拿已知浓度的BSA,或之前跑出过条带的蛋白,跟你的样品一起跑电泳

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不念过去,不畏将来
2楼2017-12-01 23:11:16
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feixieliuli

铜虫 (小有名气)

还有就是你的蛋白分子量多大,有没有可能跑出去了

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不念过去,不畏将来
3楼2017-12-01 23:11:47
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Big冬

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
亲问一下你的问题解决没?我最近也遇到了这样的问题
5楼2017-12-21 15:03:21
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