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KM71H表达不出蛋白
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本人用P. pastoris KM71H表达一个基因，不但没有检测到活性，而且做WESTERN也检测不到蛋白。现在怀疑会不会跟发酵条件有关。我实验室的方法是先用10 mL YPG培养基（yeast extract polypepton glycerol)培养，第二天转到190mL YPG, 第三天收集菌体，用无菌水洗过之后在40ML YP培养基中培养，并加甲醇诱导，然后一直培养下去。可是没有东西啊~~~~~~请问各位大神用什么方法发酵？谢谢谢谢！！！！ |
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