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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 细菌在培养过程中大量死亡是什么原因呢？
汕头大学海洋科学接受调剂
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玄晞LXJ

银虫 (小有名气)

[求助] 细菌在培养过程中大量死亡是什么原因呢？ 已有3人参与

做实验的过程中，遇到了一点麻烦。
将活化好的菌种发酵液放4℃冰箱，一周后，发酵液底部出现一层白色沉淀，应该是细菌大量死亡构成的。
之前做实验都没有出现这个情况。
活化的菌种有大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌，培养基是牛肉膏蛋白胨液体培养基。活化的菌种是用甘油-20℃冷藏了一个月的，不知道是不是这个环节出错了？会不会还有其他原因导致细菌在培养过程中大量死亡呢？
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玄晞LXJ

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1楼 2017-11-28 16:42:37
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

射手米米

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小冀-: 金币+3, 详细，鼓励回帖交流 2018-01-19 09:29:45
每次用做抑菌实验前如果你都做活菌计数，第一操作麻烦，第二浪费时间，第三，就是你说的菌会死亡，计数也不一定准确。其实如果要配置.10的6次方cfu的菌悬液，只要你配置的数量级对，做之后抑菌实，结果不会收到影响的。所以你可以采用活菌计数和比浊法，结合去做，也就是，你将你培养好的菌悬液配制成大致10的8次方cfu，10的7次方cfu，测吸光度，同时用活菌计数法测出这两瓶菌悬液的值，从而推断出，配置10的8次方cfu的菌悬液的吸光度，以后再做时，只需要测量使吸光度大致和其相同就可以了。

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11楼2017-12-03 00:45:05
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skull123

木虫 (正式写手)
一星期，瓶子底下有细菌沉下去很正常，上层液体中肯定还有细菌的，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌这三种菌估计是生命力最顽强的那一类，不会那么就死掉的，
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8楼2017-11-29 12:57:53
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游川鱼

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
snoopytbw: 金币+3, 略有帮助 2017-11-29 08:56:27
你是把发酵液放冰箱，可能是发酵液里的物质由于低温溶解度降低，沉淀出来

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玄晞LXJ
3楼2017-11-28 17:51:10
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jinpeng1980

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
玄晞LXJ: 金币+5, ★有帮助 2017-12-02 21:12:20
长时间放置，微生物菌体会沉淀。你可以先进行一下增菌扩培，确定是否菌种死亡。
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7楼2017-11-29 08:59:13
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射手米米

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
玄晞LXJ: 金币+10, ★★★很有帮助 2017-12-02 21:12:05
这是正常现象，我们做实验，在冰箱静止一段时间，瓶子底部或多或少都会出现一些沉淀，没有问题的，但是做实验时不建议你培养好菌以后放在冰箱这么久，随着放置时间的增长，菌的死亡量也在逐渐增加，不利于菌落的计数。
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玄晞LXJ
9楼2017-11-30 08:20:24
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普通回帖

362287618

新虫 (正式写手)
我也想知道为什么？想多学点知识？

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2楼2017-11-28 17:47:35
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白菜加肉

新虫 (初入文坛)
★
小冀-: 金币+1, 正解。鼓励回帖 2018-01-19 09:27:50
确定是 细菌死亡了吗？有的细菌 在培养过程中会产生沉淀的

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玄晞LXJ
4楼2017-11-28 19:23:11
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玄晞LXJ

银虫 (小有名气)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by 游川鱼 at 2017-11-28 17:51:10
你是把发酵液放冰箱，可能是发酵液里的物质由于低温溶解度降低，沉淀出来

发酵液的物质是指菌种在培养过程中产生的物质吗？如果是，这样的发酵液也可以直接用吗？
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5楼2017-11-28 20:58:14
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玄晞LXJ

银虫 (小有名气)
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引用回帖:
4楼: Originally posted by 白菜加肉 at 2017-11-28 19:23:11
确定是 细菌死亡了吗？有的细菌 在培养过程中会产生沉淀的

真的吗？我之前做实验没有那种沉淀，我一度以为它们死了。
像大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌这样的细菌在培养过程中出现沉淀属于正常情况吗？
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6楼2017-11-28 21:01:53
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玄晞LXJ

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by 射手米米 at 2017-11-30 08:20:24
这是正常现象，我们做实验，在冰箱静止一段时间，瓶子底部或多或少都会出现一些沉淀，没有问题的，但是做实验时不建议你培养好菌以后放在冰箱这么久，随着放置时间的增长，菌的死亡量也在逐渐增加，不利于菌落的计数 ...

我们一般将菌培养好后，就会及时计数菌落数。但是做后面的抑菌实验的时候，之前计过数的菌液已经出现了沉淀，不符合实验要求的菌液浓度。我们计数是用的平板菌落计数法，耗时比较长。请问有其他更方便的方法吗？或者有一些好的建议？
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10楼2017-11-30 10:36:30
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