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renchunxiao

银虫 (小有名气)

[交流] 请教RNA提取难点

我的实验要点如下:
材料:成熟番茄果肉,切成小块液氮,然后-80保存
方法:trizol
结果:几次试验均降解
可能原因:1.在普通实验台操作2.trizol 所剩不多,剩个底,可能时间长有污染3.非变形胶,电泳槽非专用4.可能是本人技术不到家,确实第一次提
请教高手指点,还望高手提供番茄rna的有效提法

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-18 at 09:31 ]
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小猫三两只

金虫 (正式写手)

RNA提取过程中很容不容易降解的,因为空气中以及人的手上有很多的RNase

提取前应将要用到的东西灭菌,设备最好用DEPC水处理,最好用一套以前没用过的,检测时的缓冲液也要用新的,电泳槽也要用DEPC水处理,胶的浓度一般用2%,因RNA片段比较小,跑得比较快.

磨样时要快,最好带上口罩,不要在人多的地方提

反正就是很麻烦的,不过我们提了好多次,现在都提的比较好了
4楼2009-02-25 10:20:57
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

降解到完全不能做实验?
其实降解多多少少都有的啦~~
能做实验就好了
2楼2009-02-24 23:46:05
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bioman9810

木虫 (著名写手)

千娇百媚是哥的妞儿

引用回帖:
Originally posted by 小猫三两只 at 2009-2-25 10:20:
RNA提取过程中很容不容易降解的,因为空气中以及人的手上有很多的RNase

提取前应将要用到的东西灭菌,设备最好用DEPC水处理,最好用一套以前没用过的,检测时的缓冲液也要用新的,电泳槽也要用DEPC水处理,胶的浓度一 ...

呵呵,握手~
熟能生巧,多提几次成功率就比较高了。
头搭毛巾也掩盖不住哥耀眼的光芒,哥一直帅的很低调,仰角45°深深陶醉中....
5楼2009-02-25 17:21:57
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cd198507

可能原因:1.在普通实验台操作2.trizol 所剩不多,剩个底,可能时间长有污染3.非变形胶,电泳槽非专用   我提了很多次也是在你这种环境下做的,其实最重要的是前面用depc水处理的东西应该经常更换,特别是枪头什么的,这个污染了是绝对做不出来的;在说有降解很正常,只要电泳跑出来是3条带,哪怕不是很清晰,后面都是能做的
6楼2009-03-01 11:09:39
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