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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教RNA提取难点
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renchunxiao

银虫 (小有名气)

[交流] 请教RNA提取难点

我的实验要点如下：
材料：成熟番茄果肉，切成小块液氮，然后-80保存
方法：trizol
结果：几次试验均降解
可能原因：1.在普通实验台操作2.trizol 所剩不多，剩个底，可能时间长有污染3.非变形胶，电泳槽非专用4.可能是本人技术不到家，确实第一次提
请教高手指点，还望高手提供番茄rna的有效提法

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-18 at 09:31 ]
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1楼 2009-02-24 20:55:18
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
降解到完全不能做实验？
其实降解多多少少都有的啦~~
能做实验就好了
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2楼2009-02-24 23:46:05
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renchunxiao

银虫 (小有名气)
xiexie
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3楼2009-02-25 08:47:48
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
RNA提取过程中很容不容易降解的,因为空气中以及人的手上有很多的RNase

提取前应将要用到的东西灭菌,设备最好用DEPC水处理,最好用一套以前没用过的,检测时的缓冲液也要用新的,电泳槽也要用DEPC水处理,胶的浓度一般用2%,因RNA片段比较小,跑得比较快.

磨样时要快,最好带上口罩,不要在人多的地方提

反正就是很麻烦的,不过我们提了好多次,现在都提的比较好了
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4楼2009-02-25 10:20:57
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bioman9810

木虫 (著名写手)

千娇百媚是哥的妞儿
引用回帖:
Originally posted by 小猫三两只 at 2009-2-25 10:20:
RNA提取过程中很容不容易降解的,因为空气中以及人的手上有很多的RNase

提取前应将要用到的东西灭菌,设备最好用DEPC水处理,最好用一套以前没用过的,检测时的缓冲液也要用新的,电泳槽也要用DEPC水处理,胶的浓度一 ...

呵呵，握手~
熟能生巧，多提几次成功率就比较高了。
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头搭毛巾也掩盖不住哥耀眼的光芒，哥一直帅的很低调，仰角45°深深陶醉中....
5楼2009-02-25 17:21:57
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cd198507

可能原因：1.在普通实验台操作2.trizol 所剩不多，剩个底，可能时间长有污染3.非变形胶，电泳槽非专用   我提了很多次也是在你这种环境下做的，其实最重要的是前面用depc水处理的东西应该经常更换，特别是枪头什么的，这个污染了是绝对做不出来的；在说有降解很正常，只要电泳跑出来是3条带，哪怕不是很清晰，后面都是能做的
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6楼2009-03-01 11:09:39
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cd198507

还有磨样的时候，最好预冷研钵，将组织拿出放在里面最好有液氮的时候磨，磨到成粉状就不用磨了，不是反到效果不好
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7楼2009-03-01 11:11:56
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匿名

用户注销 (正式写手)
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8楼2009-03-01 13:30:00
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renchunxiao

银虫 (小有名气)
谢谢各位
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9楼2009-03-02 12:21:45
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