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平板计数细菌各梯度之间不成比例？ 已有3人参与
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请教各位大神，最近做细菌平板计数实验，细菌长到OD600=0.6，用PBS缓冲液10倍系列梯度稀释，每个平板涂100μL，细菌生长情况如下： 10^-9：20,22,15,18,26,14,15,18 10^-8：56,62,65,62,69,67,64,89 10^-7：197,217,200,165,184,256,177,155 各平行重复性还可以接受，但是相邻的两个梯度之间的菌落数形不成10倍关系。 这是什么原因导致的？这种结果可以采用吗？应该怎样处理，计算菌的浓度（CFU/mL）?该如何解决这个问题？ |
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2楼2017-11-21 21:26:36
jinpeng1980
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【答案】应助回帖
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选取30－300间的稀释度计数并乘以相应稀释倍数再乘以10为每mL样品原液中的活菌总数 如若两个稀释度均在30－300 则以其各自稀释度下计算的菌落数相除 比值小于2则 取两稀释度的平均值 如若大于2，则取稀释度小的那个计算菌落数。 同一稀释度下的3个平板取3个平板的平均值。 若所有稀释度的平板上菌落数均大于300CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可 记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数再乘10进行计算。 若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数再乘10进行计算。 若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数再乘10进行计算。 若所有稀释度的平板菌落数均不在30CFU~300CFU之间,其中一部分小于30CFU或大于 300CFU时,则以最接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数再乘10进行计算 |
3楼2017-11-22 08:15:31
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6楼2017-11-28 16:18:56
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