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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » [求助]引物5’酶切位点怎么加？
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erictan2046

铜虫 (正式写手)

[交流] [求助]引物5’酶切位点怎么加？

我是在Premier5.0软件上加了酶切位点之后发现原来配对的引物不配对了，是不是不用管它？在软件上加了酶切位点却不配对了，怎么办？

谢谢。
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1楼 2009-02-24 18:56:40
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
4楼
嗯,我平时设计引物就是这样做的,保护碱基和酶切位点的碱基不会影响退火温度.只要你设计的对就行了,剩下的直接加上就可以了
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6楼2009-02-25 10:38:21
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
旁边不还有个analyze的什么按钮吗？点一下，会自动帮你对齐
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2楼2009-02-24 19:14:37
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chemifunan

木虫 (正式写手)

海王小木虫
★ ★
lwf991229(金币+2,VIP+0):感谢提供帮助~ 2-24 21:12
楼主不用这么麻烦啊 5‘端酶切位点直接手加上就行了 比如我的For引物为 GGTAGCCTAGCTGGAT 要加一个EcoRI的 EcoRI是GAATTC吧我忘了 假设是 那就最后变成 GAATTC GGTAGCCTAGCTGGAT 最后别忘加保护碱基 EcoRI 两个就行 有的要三个才切得开 那就变成 CTT GAATTC GGTAGCCTAGCTGGAT 前面的不影响退火
Rev引物要按原序列反向互补写 写完了仍然是正的 左端是5 也是这样加
然后发邮件给公司
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Bemühen Sie !
4楼2009-02-24 21:01:07
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
edit primer
改
analyze
primer
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5楼2009-02-24 23:43:24
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