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柒柒宠菇凉

新虫 (初入文坛)

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[交流] 你了解吗？一套中性粒细胞碱性磷酸酶染色的详细流程

一、
实验原理
二、
试剂
（1）固定剂：10％甲醛甲醇溶液
（2）Tris-Hcl缓冲液的配制：Tris粉〔三胺基甲烷〕4.85克溶于200ml蒸馏水中,加浓HCL1-2滴，PH调至9.2，4℃保存！
（3）作用(基质液):
磷酸萘酚钠    5mg
N-N二甲基酰胺 1ml
Tris-Hcl液    4ml
坚固蓝RR盐    5mg
（4）复染液：1%中性红

三、
实验步骤
1、新鲜、干燥的外周血或骨髓涂片（标本片及对照片）加固定剂作用30秒（染缸），水洗待干；
2、滴加作用液，室温染色15min，水洗待干；
3、1%中性红复染1min

四
注意事项
(1) 重氮盐以坚固蓝RR盐为最佳；
(2) 坚固蓝RR盐应适量：过多易造成染色失败，过少使反应减弱；
(3) 每次都要做阳性对照；
(4) 作用液新鲜配制，配好后要立即使用

五、
结果观察
(对照片成熟中性粒细胞中出现棕黑色颗粒为阳性细胞，说明染色成功)
正常人除成熟中性粒细胞NAP可见阳性外，其它血细胞均为阴性。且正常阳性率＜40%，积分值30～130分。

六、
NAP阳性结果及积分判断标准
“－”  0分，胞浆中无阳性颗粒
“+” 1分，胞浆中含有少量颗粒
“2+”  2分，胞浆中含有中等量颗粒
“3+”  3分，胞浆中含有丰富的颗粒，但胞核清楚
“4+”  4分，胞浆中含有丰富粗大的颗粒，但胞核不清楚
七、
临床意义
增高：细菌感染、类白、AA、急淋、慢粒急变、骨髓增殖性疾病，恶性淋巴瘤。
降低：慢粒、急粒、PNH、MDS、恶组

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1楼 2017-11-21 09:58:27

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