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你了解吗？一套中性粒细胞碱性磷酸酶染色的详细流程
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一、 实验原理 二、 试剂 （1）固定剂：10％甲醛甲醇溶液 （2）Tris-Hcl缓冲液的配制：Tris粉〔三胺基甲烷〕4.85克溶于200ml蒸馏水中,加浓HCL1-2滴，PH调至9.2，4℃保存！ （3）作用(基质液): 磷酸萘酚钠 5mg N-N二甲基酰胺 1ml Tris-Hcl液 4ml 坚固蓝RR盐 5mg （4）复染液：1%中性红 三、 实验步骤 1、新鲜、干燥的外周血或骨髓涂片（标本片及对照片）加固定剂作用30秒（染缸），水洗待干； 2、滴加作用液，室温染色15min，水洗待干； 3、1%中性红复染1min 四 注意事项 (1) 重氮盐以坚固蓝RR盐为最佳； (2) 坚固蓝RR盐应适量：过多易造成染色失败，过少使反应减弱； (3) 每次都要做阳性对照； (4) 作用液新鲜配制，配好后要立即使用 五、 结果观察 (对照片成熟中性粒细胞中出现棕黑色颗粒为阳性细胞，说明染色成功) 正常人除成熟中性粒细胞NAP可见阳性外，其它血细胞均为阴性。且正常阳性率＜40%，积分值30～130分。 六、 NAP阳性结果及积分判断标准 “－” 0分，胞浆中无阳性颗粒 “+” 1分，胞浆中含有少量颗粒 “2+” 2分，胞浆中含有中等量颗粒 “3+” 3分，胞浆中含有丰富的颗粒，但胞核清楚 “4+” 4分，胞浆中含有丰富粗大的颗粒，但胞核不清楚 七、 临床意义 增高：细菌感染、类白、AA、急淋、慢粒急变、骨髓增殖性疾病，恶性淋巴瘤。 降低：慢粒、急粒、PNH、MDS、恶组 |
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