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36678293铜虫 (正式写手)
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[交流]
求助，关于测序引物！
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| 我有一个基因，只知道他是用IPTG诱导表达的，但是不知道是什么载体，想给基因测序，但是不知道该用什么测序引物？麻烦大家，给点意见,T7除外！！！ |
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2楼2009-02-23 19:44:13
sutao1979
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3楼2009-02-23 20:05:46
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6楼2009-02-24 11:24:05
chemifunan
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36678293(金币+3,VIP+0):非常感谢你的分析！ 2-24 15:39
36678293(金币+3,VIP+0):非常感谢你的分析！ 2-24 15:39
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楼主你提供的条件实在太少了，但是我想有两个方法可以使用： 1 IPTG诱导需要IPTG的调控系统 乳糖操纵子 可以根据任意一个蛋白表达载体上的乳糖操纵子序列设计引物测 找一个PET质粒 看图谱上的公用区域 2 选取BamHI HindIII EcoRI 等常见的酶 对该载体进行限制性酶切 （和排Mapping差不多）然后对切下的条带亚克隆测序 测出多少是多少 有一段就行 然后根据已知序列设计引物 直到把整个质粒测通 然后上网分析一下 就知道是什么载体和上面带有什么基因了 如果楼主怕麻烦 那就直接送质粒出去 全测 送大片段样 （这个比较贵 但是多少K都能测 现在公司提供这种服务 也就是2楼ATP同学说的方法） 希望你有选择的考虑 祝好运 |
7楼2009-02-24 12:23:44
chemifunan
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