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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 小麦染色体非变性原位杂交
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李建波

新虫 (初入文坛)

[求助] 小麦染色体非变性原位杂交

最近在做小麦染色体非变性原位杂交（ND-FISH）,Oligo-pTa535信号一直很好，但是Oligo-pSc119.2信号一直有背景色。求助大神，帮我分析一下原因，万分感谢！

小麦染色体非变性原位杂交
4.png


小麦染色体非变性原位杂交-1
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小麦染色体非变性原位杂交-2
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小麦染色体非变性原位杂交-3
3.png
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踏踏实实学习！
1楼 2017-11-13 07:24:59
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781055707

木虫 (著名写手)
楼主，你的染色体是用什么试剂盒提取的呀。
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采菊东篱下，悠然见南山。
2楼2017-11-13 08:43:52
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李建波

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 781055707 at 2017-11-13 08:43:52
楼主，你的染色体是用什么试剂盒提取的呀。

滴片，没有试剂盒
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踏踏实实学习！
3楼2017-11-13 18:59:12
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scolandry404

新虫 (初入文坛)
可能是探针浓度过大，或者是洗脱强度不够导致的

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4楼2017-12-01 09:49:24
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jmagicking

新虫 (初入文坛)
李博，你好：
       看到你的做的结果，很是佩服。

我对这个计算很感兴趣，请教结果问题：
1、样本与处理是破坏了细胞，但是，没有破坏染色体。
2、样本是单细胞还是多细胞

#############
基于这样的技术是否可以进行单染色体分离？
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5楼2017-12-01 20:21:17
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李建波

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by scolandry404 at 2017-12-01 09:49:24
可能是探针浓度过大，或者是洗脱强度不够导致的

哦，谢谢，我改变下浓度再试试
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踏踏实实学习！
6楼2018-01-04 06:05:08
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李建波

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jmagicking at 2017-12-01 20:21:17
李博，你好：
       看到你的做的结果，很是佩服。

我对这个计算很感兴趣，请教结果问题：
1、样本与处理是破坏了细胞，但是，没有破坏染色体。
2、样本是单细胞还是多细胞

#############
基于这样的技术 ...

嗯，谢谢啊！

我是做小麦抗病性研究的，所用的材料是小麦的根尖分生组织区域（所以是多细胞）；采用的方法是滴片法获得染色体，利用酶解破坏掉细胞壁，但没有破坏染色体。

应用一些相关的探针可以清楚地鉴定出每条小麦染色体，国内有些实验室利用显微切割已经可以分离单条染色体；我们老板也买了显微切割设备，最近正在实践中。
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踏踏实实学习！
7楼2018-01-04 06:14:52
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sun美萍

新虫 (小有名气)
同学，你好，能问一下您，小麦您大约固定了多长时间？

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8楼2018-05-17 18:03:50
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sun美萍

新虫 (小有名气)
同学，能请您传授一下经验吗？因为我也需要做小麦的染色体，滴片的方法，你的染色体做的太好了，形态好，分散程度也好，完美，拜托您帮帮忙了

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9楼2018-05-17 18:06:31
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李建波

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by sun美萍 at 2018-05-17 18:06:31
同学，能请您传授一下经验吗？因为我也需要做小麦的染色体，滴片的方法，你的染色体做的太好了，形态好，分散程度也好，完美，拜托您帮帮忙了

同学，你的滴片技术现在怎么样了
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踏踏实实学习！
10楼2018-07-21 16:32:56
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