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abc213

银虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌的稀释平板计数,老是出不来菌落,求助各位大神 已有4人参与

本人对于细菌培养和计数一窍不通,最近由于课题要求,在做大肠杆菌的培养,采用的是稀释涂布平板,重复了好多次,都是稀释倍数10^-1的上面有菌落,不至于糊板,但到了10^-2和10^-3只有零星的几个,到了10^-4—10^-6一个菌落都没有,如下图。操作步骤完全是按照书上来的,10^-3应该是没涂开,但10^-2的情况是真的搞不懂,请大神们支招,帮帮忙!!!

大肠杆菌的稀释平板计数,老是出不来菌落,求助各位大神
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大肠杆菌的稀释平板计数,老是出不来菌落,求助各位大神-1
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我爱我熊

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by abc213 at 2017-11-13 12:37:44
1.涂布棒是玻璃的,由于是从高稀释度到低稀释度涂的(10^-6—10^-1),所以也没有更换玻璃棒和灼烧玻璃棒,涂得时候是等涂布棒完全冷却后涂的
2.培养基之前用的就是普通的营养琼脂培养基,这次换成了胰蛋白胨大豆 ...

TSA其实和营养琼脂差别不大,可以试试。
30-300应该在-4次方这个稀释度左右,具体看板子结果
纯化就是划线分离出单菌落,镜检格兰染色,方便的话简单鉴定一下(IMVC)。靛基质阳性,甲基红阳性,VP阴性,柠檬酸盐阴性

额。。。其实,你应该重复一下你的实验,说不定就结果就正常了,也许就不用分析这么多原因了
16楼2017-11-13 13:19:25
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小楚丶

新虫 (小有名气)

看起来像是污染的,重做一次看看,菌液稀释10的4次方一般都有菌

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-11-12 21:08:24
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myindexaust

铁杆木虫 (正式写手)

3楼2017-11-12 21:29:36
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abc213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by myindexaust at 2017-11-12 21:29:36
菌没有混匀吧

用的稀释涂布平板法,每次稀释后也都在涡旋振荡器上振荡过,涂布之前也会再次振荡摇匀的,之前做的时候也会出现,低稀释度有菌落,高稀释度不出菌落或零星几个菌落。所以一直在苦恼这样的原因是什么
4楼2017-11-13 08:28:02
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