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abc213

银虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌的稀释平板计数,老是出不来菌落,求助各位大神 已有4人参与

本人对于细菌培养和计数一窍不通,最近由于课题要求,在做大肠杆菌的培养,采用的是稀释涂布平板,重复了好多次,都是稀释倍数10^-1的上面有菌落,不至于糊板,但到了10^-2和10^-3只有零星的几个,到了10^-4—10^-6一个菌落都没有,如下图。操作步骤完全是按照书上来的,10^-3应该是没涂开,但10^-2的情况是真的搞不懂,请大神们支招,帮帮忙!!!

大肠杆菌的稀释平板计数,老是出不来菌落,求助各位大神
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大肠杆菌的稀释平板计数,老是出不来菌落,求助各位大神-1
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小楚丶

新虫 (小有名气)

看起来像是污染的,重做一次看看,菌液稀释10的4次方一般都有菌

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-11-12 21:08:24
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myindexaust

铁杆木虫 (正式写手)

3楼2017-11-12 21:29:36
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abc213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by myindexaust at 2017-11-12 21:29:36
菌没有混匀吧

用的稀释涂布平板法,每次稀释后也都在涡旋振荡器上振荡过,涂布之前也会再次振荡摇匀的,之前做的时候也会出现,低稀释度有菌落,高稀释度不出菌落或零星几个菌落。所以一直在苦恼这样的原因是什么
4楼2017-11-13 08:28:02
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abc213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小楚丶 at 2017-11-12 21:08:24
看起来像是污染的,重做一次看看,菌液稀释10的4次方一般都有菌

那10^-2是什么原因导致的,您知道吗?应该不是没混匀的问题吧,我稀释振荡时间挺长的
5楼2017-11-13 08:29:57
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小楚丶

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by abc213 at 2017-11-13 08:29:57
那10^-2是什么原因导致的,您知道吗?应该不是没混匀的问题吧,我稀释振荡时间挺长的...

需要有重复的,你再重复一次,如果还是这个结果我们再来分析,一般不会出现这样的结果

发自小木虫IOS客户端
6楼2017-11-13 09:08:23
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我爱我熊

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
abc213: 金币+40, ★★★很有帮助 2017-11-20 09:13:09
菌浓度不够,做一个0.5麦氏浊度的菌悬液,可以稀释到-7次方
7楼2017-11-13 09:51:23
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我爱我熊

铜虫 (初入文坛)

另外,你的菌污染了,纯化一下在做吧
8楼2017-11-13 09:53:19
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abc213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 我爱我熊 at 2017-11-13 09:51:23
菌浓度不够,做一个0.5麦氏浊度的菌悬液,可以稀释到-7次方

我是先培养一个菌落平板,划线培养24h,之后挑单菌落到5ml的无菌生理盐水里面,振荡均匀,这就是未稀释前的菌悬液,我这样操作可以吗?之后的平板我是放在4℃的冰箱里保存备用,只保存一个星期。还想问下,您是怎么制备大肠杆菌的初始菌悬液的呢?我查了好多资料,还是不清楚

发自小木虫Android客户端
9楼2017-11-13 10:43:14
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abc213

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小楚丶 at 2017-11-13 09:08:23
需要有重复的,你再重复一次,如果还是这个结果我们再来分析,一般不会出现这样的结果
...

好的

发自小木虫Android客户端
10楼2017-11-13 10:43:30
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