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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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dudeyao1020

铜虫 (正式写手)

[求助] 各位大神,请教大肠杆菌高密度发酵问题

我们用BL21高密度发酵,500 L的罐子,菌种在摇瓶中发酵诱导正常;
上罐生产:通常小罐(50 L)长到10个OD转罐,这个过程也没有太多问题,但是转到大罐(500 L)3个小时左右菌体开始自溶,OD值通常从3到4个OD开始下降,产气泡很厉害。这样的情况已经连续出现了,期间车间用甲醛熏蒸过一次,但是还是出现上述同样的情况。
请问是不是噬菌体污染,还是其它的原因?要不要考虑原始菌株问题?下一步该怎么做。
PS:期间我做过两次平板实验:自溶后的发酵液用滤膜过滤,然后滴在涂满大肠杆菌的平板上,37度培养,没有斑生成。
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b05340123

新虫 (初入文坛)

我们这边已经解决了这个问题,并已经开始大生产,不知道楼主那边怎么样。
10楼2018-07-11 09:10:57
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白纯化系统(国产AKTA)销售


好复杂的问题哦。 楼主方便把培养基信息放上来吗? 我记得有文献说培养基 CN比例不合适也可能自溶。

高密度学习中。目前才15L 高密度准备中。
2楼2017-11-13 23:02:44
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15881470571

新虫 (正式写手)

经常出现同样的问题,怀疑是环境因素

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3楼2017-11-16 11:36:47
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y214575

金虫 (小有名气)

生物工程师

考虑一下发酵液渗透压,我以前有过金属离子液配制错误造成种子死亡

发自小木虫Android客户端
4楼2017-11-19 20:10:42
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