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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 各位大神，请教大肠杆菌高密度发酵问题
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dudeyao1020

铜虫 (正式写手)

[求助] 各位大神，请教大肠杆菌高密度发酵问题

我们用BL21高密度发酵，500 L的罐子，菌种在摇瓶中发酵诱导正常；
上罐生产：通常小罐（50 L）长到10个OD转罐，这个过程也没有太多问题，但是转到大罐（500 L）3个小时左右菌体开始自溶，OD值通常从3到4个OD开始下降，产气泡很厉害。这样的情况已经连续出现了，期间车间用甲醛熏蒸过一次，但是还是出现上述同样的情况。
请问是不是噬菌体污染，还是其它的原因？要不要考虑原始菌株问题？下一步该怎么做。
PS：期间我做过两次平板实验：自溶后的发酵液用滤膜过滤，然后滴在涂满大肠杆菌的平板上，37度培养，没有斑生成。
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1楼 2017-11-10 10:54:34
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waiter

木虫 (著名写手)

蛋白层析系统（国产）销售
好复杂的问题哦。 楼主方便把培养基信息放上来吗？ 我记得有文献说培养基 CN比例不合适也可能自溶。

高密度学习中。目前才15L 高密度准备中。
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2楼2017-11-13 23:02:44
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b05340123

新虫 (初入文坛)
我们这边已经解决了这个问题，并已经开始大生产，不知道楼主那边怎么样。
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10楼2018-07-11 09:10:57
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15881470571

新虫 (正式写手)
经常出现同样的问题，怀疑是环境因素

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3楼2017-11-16 11:36:47
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y214575

金虫 (小有名气)

生物工程师
考虑一下发酵液渗透压，我以前有过金属离子液配制错误造成种子死亡

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4楼2017-11-19 20:10:42
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gy234

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by waiter at 2017-11-13 23:02:44
好复杂的问题哦。 楼主方便把培养基信息放上来吗？ 我记得有文献说培养基 CN比例不合适也可能自溶。

高密度学习中。目前才15L 高密度准备中。

楼主可否把看到的这篇文献给我发一份  目前也遇到这样的问题  万分感谢
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7楼2018-01-08 15:39:12
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b05340123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 淡漠繁华 at 2018-01-06 19:48:30
自溶后可不可以长起来？

我目前做发酵也遇到这样的问题，自溶之后可以长起来  噬菌斑检测也没有 关键是长起来还有表达 产量还不低
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8楼2018-03-21 08:53:03
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普通回帖

xuzhengnjut

新虫 (正式写手)
我遇到同样问题，排除过培养基，因为我更换多种培养基也没用，排除种子，我用不同厂家感受态都做过，结果一样。我认为是噬菌体

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5楼2017-12-02 23:03:47
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淡漠繁华

新虫 (初入文坛)
自溶后可不可以长起来？

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6楼2018-01-06 19:48:30
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13811214897

新虫 (初入文坛)
配方和培养过程导致

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9楼2018-03-21 11:13:11
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