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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 胰腺组织免疫荧光染色
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随烟散播

新虫 (初入文坛)

[求助] 胰腺组织免疫荧光染色 已有1人参与

各位大神急求，
小弟做的是胰腺组织胰岛素的免疫荧光染色，组织是新鲜取材的胰腺立马拿去病理科做冰冻切片，风干后，冷丙酮4℃固定15min，自然晾干，TBS洗3遍，每次5min，0.4％Tritin（新鲜配置）10min，TBS洗3遍，2％BSA作用30min，甩干不洗，滴加兔抗小鼠一抗（做免疫组化能出结果），4℃过夜，37℃复温30min，TBS3遍，滴加SANTA鼠抗兔荧光二抗，37摄氏度1h，TBS洗三遍，显微镜下观察拍照。结果如下：有特异性抗原的地方反而没有荧光结合。其余非特异性结合很强，小弟已经做过很多遍了，一抗浓度也摸索过了，现在已经是没辙了，由于面临毕业，心急万分，请各位大神老师不吝赐教。
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1楼 2017-11-08 12:27:57
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gloomygirl-1

木虫 (小有名气)
楼主你好，请问你做这个的时候清洗那么多次是怎么清洗的啊？组织不会被洗掉吗？
我最近也在做这个，由于用的玻片是普通玻片，一洗就掉，是不是必须要用带正电的粘附玻片啊？
想请教你是在怎么洗的，谢谢！
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2楼2017-12-28 22:07:39
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随烟散播

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gloomygirl-1 at 2017-12-28 22:07:39
楼主你好，请问你做这个的时候清洗那么多次是怎么清洗的啊？组织不会被洗掉吗？
我最近也在做这个，由于用的玻片是普通玻片，一洗就掉，是不是必须要用带正电的粘附玻片啊？
想请教你是在怎么洗的，谢谢！

你好！
我用的是粘附载玻片，洗的时候我是浸泡的
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3楼2018-01-04 09:47:39
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wshtl123

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

检测胰岛素分泌情况，用免疫荧光来做的话，请问用石蜡切片可以吗？还是冰冻切片，为什么，非常感谢前辈。
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4楼2025-02-15 16:02:56
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