24小时热门版块排行榜    

查看: 1366  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

changlinxy

铜虫 (初入文坛)

[求助] 异源基因拟南芥互补做荧光定量PCR 已有1人参与

各位大神,我最近遇到一个很尴尬的问题,拟南芥某个基因的突变体,用了其他物种这个基因的同源基因来互补,互补之后要做real time看表达。但是想到拟南芥野生型这个基因和其他物种中用来互补的基因只是同源基因并不是一样的,这样野生型能做对照么?怎么做?这个相对定量还能做不?感觉很纠结,希望大神能帮我一把,或者有看到这方面文献的希望推荐一下,急求,跪谢!!!
回复此楼
ibelieveicanfly
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by changlinxy at 2017-10-25 17:27:31
好的,那就是用野生型和空载体做正副对照?野生型的话是要用另一对引物扩拟南芥本来那个基因么?您是否看过类似的文献?我没有找到,如果能推荐两篇的话十分感谢!...

你看一些前两年水稻的文章,都是这么做的。都是水稻基因转入拟南芥同源基因突变体中验证功能……

发自小木虫IOS客户端
不是优秀,而是不可替代
8楼2017-10-25 18:42:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个一般是用空载体的转基因植株做副对照,然后,你的转基因材料也要多几个表达系……

发自小木虫IOS客户端
不是优秀,而是不可替代
2楼2017-10-25 12:29:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

changlinxy

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by didongwei at 2017-10-25 12:29:55
这个一般是用空载体的转基因植株做副对照,然后,你的转基因材料也要多几个表达系……

空载体和野生型都有,但是问题是能不能用它们作对照?因为基因是不一样的,野生型里是拟南芥本身的基因,空载体转的是突变体,没有这个基因,转基因转的是外源的同源基因
ibelieveicanfly
3楼2017-10-25 14:20:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

didongwei

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by changlinxy at 2017-10-25 14:20:28
空载体和野生型都有,但是问题是能不能用它们作对照?因为基因是不一样的,野生型里是拟南芥本身的基因,空载体转的是突变体,没有这个基因,转基因转的是外源的同源基因...

这个没问题的,而且也只能这么做

发自小木虫IOS客户端
不是优秀,而是不可替代
4楼2017-10-25 14:22:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 14/700 2026-03-15 23:53 by 不负韶华的虎
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +6 一鸭鸭哟 2026-03-14 7/350 2026-03-15 22:12 by Winj1e
[考研] 311求调剂 +5 冬十三 2026-03-15 5/250 2026-03-15 18:38 by 无际的草原
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 一志愿天大化工(085600)调剂总分338 +6 蔡大美女 2026-03-09 6/300 2026-03-14 02:46 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +5 简木ChuFront 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:29 by JourneyLucky
[考研] 271求调剂 +10 生如夏花… 2026-03-11 10/500 2026-03-14 00:35 by 卖报员小雨
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 土木第一志愿276求调剂,科研和技能十分丰富,求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。,。,。,。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 274求调剂0856材料化工 +12 z2839474511 2026-03-11 13/650 2026-03-13 10:39 by peike
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
[基金申请] 提交后的基金本子,已让学校撤回了,可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
信息提示
请填处理意见