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imrxxxu

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】求助多孔材料上种植贴壁细胞的具体步骤

请各位过来人说一下您在多孔材料上种植贴壁细胞的实验过程和诀窍,谢谢!
ps:我用的材料为孔径500-1000μm的陶瓷材料。
    对于能够提供详细可行操作方法的同学有适量金币奖励。

[ Last edited by yusen_1982 on 2009-2-20 at 17:44 ]
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whn732

禁虫 (正式写手)

★ ★ ★
wgcui(金币+1,VIP+0):欢迎多多讨论! 2-20 19:07
imrxxxu(金币+2,VIP+0):谢谢解答,希望能得到您更多的指点。 2-20 19:25
首先是细胞的培养,不知道你用的什么细胞,我用过MSC一般是在第三代的时候使用,活性比较强。如果是细胞株应该就无所谓哪一带了。
材料的准备,消毒灭菌是关键,也取决于你的材料。
种细胞的具体步骤:细胞置于孔板后,加入培养基过夜。有的材料细胞粘附差,就在支架上滴加小牛血清,再加入培养基。然后就是消化细胞,计算细胞的浓度。吸出原有培养基,再将细胞滴加如材料,当然加的时候尽量都加在材料表面。然后放入培养箱就完事。其实挺简单,就是麻烦点。做两次就熟练了。
3楼2009-02-20 18:58:34
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travelerchem

至尊木虫 (知名作家)


imrxxxu(金币+1,VIP+0):谢谢回帖,希望得到更多的讨论。 2-20 19:50
你要做黏附还是增殖?
2楼2009-02-20 18:24:26
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imrxxxu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by travelerchem at 2009-2-20 18:24:
你要做黏附还是增殖?

主要检测成骨细胞的增殖分化情况。
4楼2009-02-20 19:23:01
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imrxxxu

金虫 (正式写手)


wgcui(金币+1,VIP+0):请再具体些。希望多多讨论! 2-20 22:45
引用回帖:
Originally posted by whn732 at 2009-2-20 18:58:
首先是细胞的培养,不知道你用的什么细胞,我用过MSC一般是在第三代的时候使用,活性比较强。如果是细胞株应该就无所谓哪一带了。
材料的准备,消毒灭菌是关键,也取决于你的材料。
种细胞的具体步骤:细胞置于 ...

我主要是想知道如何是尽量多的细胞在支架(大孔泡沫结构材料)上贴壁生长,而尽量少的落到培养板底面。
支架材料结构如附图所示,实际使用的材料孔比图中小些,孔径约1mm吧。
5楼2009-02-20 19:31:54
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