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huan121004

铜虫 (小有名气)

[交流] 单增李斯特菌连接19-T载体转化相关问题

我的目的基因片段大小为1300bp,胶回收产物连接19-T simple ,
连接体系为   5微升solution 1
                  4.5微升 回收产物
                  0.5微升 19-T
                  16度过夜连接,转化到DH5α12h,氨苄抗性LB板,pcr验证总是不出条带,什么原因啊?
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我要努力 成为 女王
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huan121004

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fsy3224502 at 2017-10-24 23:43:36
第一 PCR是不是用的taq酶?还是高保真的? 第二 跑胶条带是不是单一? 第三 有没有做胶回收?

已经连上  谢谢 可能只是我不知道!
我要努力 成为 女王
5楼2017-10-25 16:44:45
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fsy3224502

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
huan121004: 金币+1, 谢谢回帖 2017-10-25 16:46:13
第一 PCR是不是用的taq酶?还是高保真的? 第二 跑胶条带是不是单一? 第三 有没有做胶回收?

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-10-24 23:43:36
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xuyuzhi

新虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
huan121004: 金币+1, 谢谢加油鼓气 2017-10-25 16:45:58
很好连,看看回收产物浓度

发自小木虫Android客户端
17343151072目前在一道生物,常联系
3楼2017-10-25 08:13:36
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huan121004

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xuyuzhi at 2017-10-25 08:13:36
很好连,看看回收产物浓度

谢谢 ,已经连上,重新挑菌落做了验证!
我要努力 成为 女王
4楼2017-10-25 16:44:02
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