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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 单增李斯特菌连接19-T载体转化相关问题
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huan121004

铜虫 (小有名气)

[交流] 单增李斯特菌连接19-T载体转化相关问题

我的目的基因片段大小为1300bp，胶回收产物连接19-T simple ，
连接体系为   5微升solution 1
                  4.5微升 回收产物
                  0.5微升 19-T
                  16度过夜连接，转化到DH5α12h,氨苄抗性LB板，pcr验证总是不出条带，什么原因啊？
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我要努力 成为 女王
1楼 2017-10-24 21:58:32
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fsy3224502

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
huan121004: 金币+1, 谢谢回帖 2017-10-25 16:46:13
第一 PCR是不是用的taq酶？还是高保真的？ 第二 跑胶条带是不是单一？ 第三 有没有做胶回收？

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2楼2017-10-24 23:43:36
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xuyuzhi

新虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
huan121004: 金币+1, 谢谢加油鼓气 2017-10-25 16:45:58
很好连，看看回收产物浓度

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17343151072目前在一道生物，常联系
3楼2017-10-25 08:13:36
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huan121004

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xuyuzhi at 2017-10-25 08:13:36
很好连，看看回收产物浓度

谢谢 ，已经连上，重新挑菌落做了验证！
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我要努力 成为 女王
4楼2017-10-25 16:44:02
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huan121004

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fsy3224502 at 2017-10-24 23:43:36
第一 PCR是不是用的taq酶？还是高保真的？ 第二 跑胶条带是不是单一？ 第三 有没有做胶回收？

已经连上  谢谢 可能只是我不知道！
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我要努力 成为 女王
5楼2017-10-25 16:44:45
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fsy3224502

金虫 (小有名气)
客气啦

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6楼2017-10-25 23:49:17
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