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yidaqunyan

木虫 (正式写手)

博士

[交流] 请教大肠杆菌耐受氯霉素实验的问题

各位老师,向大家请教一个关于大肠杆菌耐受氯霉素实验的问题
我用的菌株是DH5-a,做耐受实验的时候,是用20mL的LB培养基平板划线培养,培养基的氯霉素浓度分别是:
1,12.5ug/mL  2,15ug/mL  3,17.5ug/mL  4,20ug/mL  5,22.5ug/mL  6,25ug/mL
氯霉素是先溶成12500ug/mL的溶液在倒平板的时候加进去的,然后摇匀

实验结果,1,2两个浓度比较低的平板没有菌体生长,相反3,4,5,6三个氯霉素浓度比较大的平板反而生长的很好

请问各位老师,是什么原因造成这种现象呢?常理应该是浓度越大越不易生长的啊!

我们实验室是以发酵为主,做大肠杆菌实验是第一次,话题有些小儿科,但是还是希望各位老师耐心解答,非常感谢!
祝各位老师牛年大顺~!

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-18 at 10:29 ]
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不孝有三,读博为大!
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jnckkang

金虫 (小有名气)

不应该啊,我刚做的25还很好
9楼2009-02-22 14:36:02
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fraser

银虫 (正式写手)

★ ★
yidaqunyan(金币+1,VIP+0):谢谢老师第一个给我回答,金币有限不成敬意~ 2-20 11:23
yidaqunyan(金币+1,VIP+0):谢谢关注 2-21 23:53
重新做一次,控制好温度,氯霉素加入培养基时的温度要适当!
2楼2009-02-20 11:03:59
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yidaqunyan

木虫 (正式写手)

博士

引用回帖:
Originally posted by fraser at 2009-2-20 11:03:
重新做一次,控制好温度,氯霉素加入培养基时的温度要适当!

我当时是把培养基晾到60度时倒得平板,在倒平板之后往平板里加的 氯霉素

我想请问老师,培养基多少度比较合适呢?大肠杆菌耐受氯霉素的浓度大概是多少呢?
不孝有三,读博为大!
3楼2009-02-20 11:20:44
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Lixiaolang

铁虫 (初入文坛)


yidaqunyan(金币+1,VIP+0):谢谢你的关注,朋友~ 2-20 15:19
我们倒平板时,没实测过温度,但是用手拿起三角瓶(培养基我们是用三角瓶装,灭菌的),不烫手,就是手能拿得住。上述意见,仅供参考!
4楼2009-02-20 14:34:35
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