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谢尚峰就是我

新虫 (初入文坛)

[求助] 两条单链引物如何合成双链已有1人参与

求具体的实验步骤以及依据

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不吃M的鱼

金虫 (小有名气)

引物退火呗。首先引物稀释到10um,分别加25ul到PCR管里面。退火有2种方式,一种是放95度水里面让其自然冷却到室温。还有一种用PCR仪,跑几个循环降

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2楼2017-10-20 12:43:29
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匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
3楼2017-10-22 09:49:53
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jinkairui123

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
双链引物的制备方法
    1)      用STE Buffer (10 mM Tris    pH=8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA)溶解DNA,浓度:1-5OD/100μl;

    2)      将二条链等摩尔混合;

    3)      94℃保温5分钟后,徐冷至室温;

    4)      供实验使用。
武汉金开瑞生物,提供核酸和蛋白的整体研究方案
4楼2017-10-23 10:37:51
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