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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 两条单链引物如何合成双链
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谢尚峰就是我

新虫 (初入文坛)

[求助] 两条单链引物如何合成双链 已有1人参与

求具体的实验步骤以及依据

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1楼 2017-10-20 11:00:14
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不吃M的鱼

金虫 (小有名气)
引物退火呗。首先引物稀释到10um，分别加25ul到PCR管里面。退火有2种方式，一种是放95度水里面让其自然冷却到室温。还有一种用PCR仪，跑几个循环降

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2楼2017-10-20 12:43:29
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匿名

用户注销 (著名写手)
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3楼2017-10-22 09:49:53
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jinkairui123

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
双链引物的制备方法
    1)      用STE Buffer (10 mM Tris    pH=8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA)溶解DNA，浓度：1－5OD/100μl；

    2)      将二条链等摩尔混合；

    3)      94℃保温5分钟后，徐冷至室温；

    4)      供实验使用。
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武汉金开瑞生物，提供核酸和蛋白的整体研究方案
4楼2017-10-23 10:37:51
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