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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » sephadex LH-20纯化过完大孔柱的多酚粗提物
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niyyhh

新虫 (小有名气)

[求助] sephadex LH-20纯化过完大孔柱的多酚粗提物

如题，请教大家一下，过凝胶柱能用梯度洗吗？凝胶在不同溶剂中的溶胀程度不一样，梯度洗不就有问题吗？还有，我准备分离多酚化合物，极性大，是不是就不能用纯甲醇做洗脱剂。   分离小白一个，先谢谢大家了

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1楼 2017-10-18 16:19:34
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ZHANGUM

新虫 (小有名气)
LH20同时具有分子筛和吸附柱层析（溶剂选择不同，可正相或者反相），LH20对极性接近但结构类型不同的化合物分离度好，对结构类似的化合物分离不是太好。LH20的上样量不大，所以可用于后期分离或者制备液相前样品除杂用。

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9楼2017-10-28 10:48:32
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sun123peng

新虫 (小有名气)
才接触植化，建议百分之九十等度冲，别着急，凝胶越慢越好。

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2楼2017-10-18 19:50:20
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niyyhh

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by sun123peng at 2017-10-18 19:50:20
才接触植化，建议百分之九十等度冲，别着急，凝胶越慢越好。

谢谢呢

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3楼2017-10-20 21:47:04
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lyh701

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凝胶分离是分子筛原理，跟极性应该没多大关系吧   我们一般不会梯度洗脱

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niyyhh
4楼2017-10-21 22:38:34
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akber123

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niyyhh
5楼2017-10-22 00:08:44
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niyyhh

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4楼: Originally posted by lyh701 at 2017-10-21 22:38:34
凝胶分离是分子筛原理，跟极性应该没多大关系吧   我们一般不会梯度洗脱

谢谢啊，我看到有些贴子说梯度洗可以起到反相作用

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6楼2017-10-26 20:42:27
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niyyhh

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5楼: Originally posted by akber123 at 2017-10-22 00:08:44
凝胶按分子大小分化合物的，一般等度洗脱，过柱子流速要小一点，一般调一分钟一滴。另外分离多酚类化合物建议你过 聚酰胺柱

实验室只有凝胶，聚酰胺好像也挺贵的，等度洗，一般用多大浓度的呢？我60%洗出一个比较纯的物质，如果再用这个样上凝胶进行再次分离纯化，该用多大浓度的洗呢？小菜鸟求帮忙了

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7楼2017-10-26 20:45:54
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akber123

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8楼2017-10-27 12:35:05
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niyyhh

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8楼: Originally posted by akber123 at 2017-10-27 12:35:05
据我所知，这个看你目标化合物，你在60%能分纯物质，很厉害了，凝胶柱能分纯物质很有难度的，我觉得你可以继续这个梯度。我呢，凝胶柱一般是用在化合物的粗分段，然后再用硅胶住，制备柱来纯化物质。加油！
...

谢谢，加油加油

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10楼2017-10-29 18:00:06
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