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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 综合其他 » 细胞培养求助，谢谢啦！
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hjj2784

木虫 (著名写手)

[求助] 细胞培养求助，谢谢啦！ 已有1人参与

颗粒细胞能传代么？能传多少代？分离颗粒细胞时加的Percoll液有什么作用？不加可以么？

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默默无闻，潜心修炼！
1楼 2017-10-18 11:28:32
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e生物圈

捐助贵宾 (正式写手)

实验外包，请联系15110261808

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hjj2784: 金币+15, ★★★很有帮助 2017-10-19 08:31:31
我查了一下，有的说可以传代，有的说不能传代，估计及时能传也是传不了几代，这个细胞报道的较少，而且比较难养。做好心理准备！

颗粒细胞种类不少，不知道你具体是什么品种的呀。

Percoll液是细胞分离液，你百度一下就知道啥作用了，我给你粘贴一下哈。

Percoll具有渗透性低、不穿透细胞、粘度低、密度高和无毒害等优点，与目前常用的密度梯度离心介质，包括蔗糖（Sucrose）、血清白蛋白（Serum albumin, ALB）、聚蔗糖（Ficoll）、氯化铯（CsCl）等相比，是目前较理想的介质。Percoll密度梯度离心已被多次成功地用于动物细胞及其细胞器的分离，纯化了包括人血液细胞、骨髓细胞、红血球细胞、白血球细胞、淋巴细胞、肝细胞等在内的十余种动物细胞。这一技术也开始用于用于分离和纯化植物原生质体、核、叶绿体和线粒体。

Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(<20mosm／kg H２O), 粘度也很小，可形成高达1.3g／ml密度，采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200～1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于Percoll扩散常数低，所形成的梯度十分稳定。此外，Percoll不穿透生物膜，对细胞无毒害，因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒，还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。
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2楼2017-10-18 15:41:23
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青灯相忆

新虫 (小有名气)
实际操作得看细胞种类，我做过的一般五六代，理论上可以到十代，但是后面质量会很差。

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3楼2017-10-19 11:35:34
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