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hjj2784

木虫 (著名写手)

[求助] 细胞培养求助,谢谢啦! 已有1人参与

颗粒细胞能传代么?能传多少代?分离颗粒细胞时加的Percoll液有什么作用?不加可以么?

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hjj2784: 金币+15, ★★★很有帮助 2017-10-19 08:31:31
我查了一下,有的说可以传代,有的说不能传代,估计及时能传也是传不了几代,这个细胞报道的较少,而且比较难养。做好心理准备!

颗粒细胞种类不少,不知道你具体是什么品种的呀。

Percoll液是细胞分离液,你百度一下就知道啥作用了,我给你粘贴一下哈。

Percoll具有渗透性低、不穿透细胞、粘度低、密度高和无毒害等优点,与目前常用的密度梯度离心介质,包括蔗糖(Sucrose)、血清白蛋白(Serum albumin, ALB)、聚蔗糖(Ficoll)、氯化铯(CsCl)等相比,是目前较理想的介质。Percoll密度梯度离心已被多次成功地用于动物细胞及其细胞器的分离,纯化了包括人血液细胞、骨髓细胞、红血球细胞、白血球细胞、淋巴细胞、肝细胞等在内的十余种动物细胞。这一技术也开始用于用于分离和纯化植物原生质体、核、叶绿体和线粒体。

Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(<20mosm/kg H2O), 粘度也很小,可形成高达1.3g/ml密度,采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200~1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于Percoll扩散常数低,所形成的梯度十分稳定。此外,Percoll不穿透生物膜,对细胞无毒害,因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒,还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。
2楼2017-10-18 15:41:23
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青灯相忆

新虫 (小有名气)

实际操作得看细胞种类,我做过的一般五六代,理论上可以到十代,但是后面质量会很差。

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3楼2017-10-19 11:35:34
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