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sunmaocai

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助 关于质粒构建

为什么我质粒构建好后用pcr验证可以,但再用原来的酶切位点却切不出来,请高手帮忙解答。

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-18 at 10:29 ]
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jqq1985

银虫 (正式写手)


sunmaocai(金币+1,VIP+0):66 2-23 10:52
可能有位点突变了~
4楼2009-02-19 19:56:09
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查看全部 7 个回答

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

测序看一下就好
酶切鉴定有时候就是怪怪的
2楼2009-02-19 18:51:32
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sunqx

木虫 (著名写手)


sunmaocai(金币+1,VIP+0):tt 2-23 10:35
引用回帖:
Originally posted by sunmaocai at 2009-2-19 15:36:
为什么我质粒构建好后用pcr验证可以,但再用原来的酶切位点却切不出来,请高手帮忙解答。

有可能污染了。
不加模板做个pcr
5楼2009-02-19 20:34:37
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小猫三两只

金虫 (正式写手)


sunmaocai(金币+1,VIP+0):yy 2-23 10:37
PCR会有阳性污染。酶切还比较准确一点,但若是正好在那个位点突变了就不好说了,最准确的方法就是测下序看看
6楼2009-02-22 19:03:44
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