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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助 关于质粒构建
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sunmaocai

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助 关于质粒构建

为什么我质粒构建好后用pcr验证可以，但再用原来的酶切位点却切不出来，请高手帮忙解答。

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-18 at 10:29 ]
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1楼 2009-02-19 15:36:42
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
测序看一下就好
酶切鉴定有时候就是怪怪的
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2楼2009-02-19 18:51:32
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张力民1598

铜虫 (小有名气)
酶失活了吧
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3楼2009-02-19 19:11:48
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jqq1985

银虫 (正式写手)
★
sunmaocai(金币+1,VIP+0):66 2-23 10:52
可能有位点突变了~
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4楼2009-02-19 19:56:09
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sunqx

木虫 (著名写手)
★
sunmaocai(金币+1,VIP+0):tt 2-23 10:35
引用回帖:
Originally posted by sunmaocai at 2009-2-19 15:36:
为什么我质粒构建好后用pcr验证可以，但再用原来的酶切位点却切不出来，请高手帮忙解答。

有可能污染了。
不加模板做个pcr
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2009-02-19 20:34:37
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
★
sunmaocai(金币+1,VIP+0):yy 2-23 10:37
PCR会有阳性污染。酶切还比较准确一点，但若是正好在那个位点突变了就不好说了，最准确的方法就是测下序看看
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2009-02-22 19:03:44
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boouy

银虫 (正式写手)
强烈建议测序！
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7楼2009-02-23 07:25:54
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