| 查看: 3063 | 回复: 18 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
superdex75纯化蛋白 低盐反而出峰，高盐不出峰 已有7人参与
|
|||
|
大家好，请教一个问题，我在纯化抗体片段，约50KD，杂蛋白120KD，用S75pg这个柱子。现在有一个很奇怪的现象，用20mM Tris+100mM Nacl pH7.42CV都不出峰，在1cv时已出盐峰。换水冲1CV后反而在电导下降时，即缓冲液约换成纯水时出了目的蛋白峰。理论上加了盐应该利于蛋白下来的，为什么现在反而是低盐蛋白下来了。大家对此现象有什么好解释吗？ 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
317求调剂
已经有7人回复
-
复试调剂，一志愿南农083200食品科学与工程
已经有4人回复
-
一志愿太原理工安全工程300分，求调剂
已经有3人回复
-
284求调剂
已经有11人回复
-
食品工程专硕求调剂
已经有3人回复
-
324求调剂
已经有7人回复
-
一志愿武汉理工，总分321，英一数二，求老师收留。
已经有4人回复
-
287求调剂
已经有7人回复
-
325求调剂
已经有5人回复
-
343求调剂
已经有4人回复
walking dead
金虫 (小有名气)
填料制备和蛋白纯化专家
- 应助: 40 (小学生)
- 贵宾: 0.001
- 金币: 1354.8
- 散金: 59
- 红花: 17
- 帖子: 287
- 在线: 56.5小时
- 虫号: 4175016
- 注册: 2015-10-26
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
高盐洗脱并不适宜所有蛋白的洗脱，有些会在高盐时变性或者沉淀，自然无法出峰。所以要选择适当的离子强度的洗脱液。 发自小木虫Android客户端 |
教洋文3楼2017-10-18 07:39:42
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
盐溶盐析，可能对于你这个蛋白离子强度低一些更合适吧，可以把氯化钠去掉，再跑一次superdex75看看分离情况。 发自小木虫Android客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
2楼2017-10-14 21:27:38
4楼2017-10-24 23:57:57
5楼2017-10-24 23:59:15
20