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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » DNA跑非变性聚丙烯酰胺，银染后什么也没有，
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半城考研

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA跑非变性聚丙烯酰胺，银染后什么也没有， 已有1人参与

最近在做DNA跑8%的非变性聚丙烯酰胺，但是银染过后，只有泳道，MARKER，产物都没有，这是咋回事？
8%非变性聚丙烯酰胺配方：30%丙烯酰胺：1.6ml    5XTBE：1.2ml  10%AP：36ul   TEMED：9ul
电泳：120v，35min
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1楼 2017-10-12 10:41:25
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971731043

新虫 (职业作家)
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4楼: Originally posted by 971731043 at 2017-10-12 10:57:22
摸索，你做RLFP还生气

你做RLFP还是SSCP?

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5楼2017-10-12 10:58:01
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971731043

新虫 (职业作家)
你这好奇怪，染不出来？固定液，银染液，然后显影液？

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8楼2017-10-12 11:05:58
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半城考研

新虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by 971731043 at 2017-10-12 11:05:58
你这好奇怪，染不出来？固定液，银染液，然后显影液？

显色后，能看出泳道，就是没有条带，也不知道咋回事，重复了好多次，结果一样
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9楼2017-10-12 11:08:33
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971731043

新虫 (职业作家)
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9楼: Originally posted by 半城考研 at 2017-10-12 11:08:33
显色后，能看出泳道，就是没有条带，也不知道咋回事，重复了好多次，结果一样...

是不是样品漂了？正负极反了？还是没有上样缓冲液啊，能发张图看看么？

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10楼2017-10-12 11:16:08
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971731043

新虫 (职业作家)
时间太短，

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2楼2017-10-12 10:47:50
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半城考研

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by 971731043 at 2017-10-12 10:47:50
时间太短，

可是溴酚蓝已经跑到胶低部了，那一般120v跑多长时间，谢谢啦
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3楼2017-10-12 10:55:04
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971731043

新虫 (职业作家)
摸索，你做RLFP还生气

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4楼2017-10-12 10:57:22
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半城考研

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 971731043 at 2017-10-12 10:57:22
摸索，你做RLFP还生气

是心累，已经重复好多次，结果都一样
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6楼2017-10-12 10:58:59
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半城考研

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 971731043 at 2017-10-12 10:58:01
你做RLFP还是SSCP?
...

都不是，我是以单链DNA为模板做PCR，然后跑琼脂糖条带位置一直不对，就想试试page
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7楼2017-10-12 11:03:43
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