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半城考研

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA跑非变性聚丙烯酰胺,银染后什么也没有,已有1人参与

最近在做DNA跑8%的非变性聚丙烯酰胺,但是银染过后,只有泳道,MARKER,产物都没有,这是咋回事?
8%非变性聚丙烯酰胺配方:30%丙烯酰胺:1.6ml    5XTBE:1.2ml  10%AP:36ul   TEMED:9ul
电泳:120v,35min
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971731043

新虫 (职业作家)

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4楼: Originally posted by 971731043 at 2017-10-12 10:57:22
摸索,你做RLFP还生气

你做RLFP还是SSCP?

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5楼2017-10-12 10:58:01
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971731043

新虫 (职业作家)

你这好奇怪,染不出来?固定液,银染液,然后显影液?

发自小木虫Android客户端
8楼2017-10-12 11:05:58
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半城考研

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 971731043 at 2017-10-12 11:05:58
你这好奇怪,染不出来?固定液,银染液,然后显影液?

显色后,能看出泳道,就是没有条带,也不知道咋回事,重复了好多次,结果一样
9楼2017-10-12 11:08:33
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971731043

新虫 (职业作家)

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9楼: Originally posted by 半城考研 at 2017-10-12 11:08:33
显色后,能看出泳道,就是没有条带,也不知道咋回事,重复了好多次,结果一样...

是不是样品漂了?正负极反了?还是没有上样缓冲液啊,能发张图看看么?

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10楼2017-10-12 11:16:08
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971731043

新虫 (职业作家)

2楼2017-10-12 10:47:50
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半城考研

新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by 971731043 at 2017-10-12 10:47:50
时间太短,

可是溴酚蓝已经跑到胶低部了,那一般120v跑多长时间,谢谢啦
3楼2017-10-12 10:55:04
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971731043

新虫 (职业作家)

4楼2017-10-12 10:57:22
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半城考研

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 971731043 at 2017-10-12 10:57:22
摸索,你做RLFP还生气

是心累,已经重复好多次,结果都一样
6楼2017-10-12 10:58:59
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半城考研

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 971731043 at 2017-10-12 10:58:01
你做RLFP还是SSCP?
...

都不是,我是以单链DNA为模板做PCR,然后跑琼脂糖条带位置一直不对,就想试试page
7楼2017-10-12 11:03:43
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