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famgy

新虫 (初入文坛)

[求助] RACR扩未知序列 已有2人参与

我正在做5'3'RACE,得到的片段胶回收后条带是可以的,菌液pcr也是正常的,但是测序回来的序列重叠区匹配不上,我填写的测序单是测通,没有填片段大小(有说可能是我没有填片段大小测序测的片段错了)。想问下大家做RACE时怎么填测序单的,还是我的实验需要注意其他的事项,感谢,感谢~~

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ljourney

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ayfly at 2018-01-10 20:33:51
楼主,您好!请问你最近有什么进展么,我也是和你一样的情况,我已经做了很久了,总是扩不出来,每次也是有条带,但是测序结果总是比对不上。。。

我也是同样的情况,请问你最近有做出来了么?

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9楼2018-03-20 15:23:19
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查看全部 11 个回答

晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-10-15 07:49:52
RACE时怎么填测序单:
首先 上栏  自己的名字 邮箱  电话
下面  
样品名;
样品类型(菌液,质粒,PCR产物(是否纯化)等);
引物(如果是菌液或质粒填了质粒名字就行,如果是PCR产物需要你自己提供PCR引物) ;
片段长度就是你想测的长度;
单向双向,是否测桶取决于你的目的,如果测全长最好双向测通,如果只是验证可以只测单向的一个反应
其它的抗性可以选填,如果写了质粒名字不填一般他们也知道。
及时行乐,人生不留遗憾!
2楼2017-10-12 08:05:52
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famgy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-10-12 08:05:52
RACE时怎么填测序单:
首先 上栏  自己的名字 邮箱  电话
下面  
样品名;
样品类型(菌液,质粒,PCR产物(是否纯化)等);
引物(如果是菌液或质粒填了质粒名字就行,如果是PCR产物需要你自己提供PCR引物 ...

我的条带在实验过程都是正常的,就是测序回来的结果跟我的条带一点也不对。所以还在找原因。

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3楼2017-10-14 18:50:05
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吴美儒

新虫 (小有名气)

我也是的,扩了好几次了

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4楼2017-11-19 17:38:53
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