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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量pcr
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fxb0418

新虫 (初入文坛)

[交流] 荧光定量pcr

石蜡标本提前的RNA逆转录后进行PCR,内参Ct值在30左右，目的基因都在33左右，请教一下如何改进

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no pains,no gains!
1楼 2017-10-11 16:26:07
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山还在那儿

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你想改进什么方面？
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2楼2017-10-12 09:29:00
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fxb0418

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 山还在那儿 at 2017-10-12 09:29:00
你想改进什么方面？

我想让ct值变小点，提高到25/26左右

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no pains,no gains!
3楼2017-10-12 10:05:54
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山还在那儿

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by fxb0418 at 2017-10-12 10:05:54
我想让ct值变小点，提高到25/26左右
...

建议：
1.提高样品质量，可用试剂盒或进口试剂盒提取
2.如果采用的是国产的rt-qpcr试剂盒，建议你换成进口的，这样ct值一般会降低

祝好
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fxb0418
4楼2017-10-12 11:21:23
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fxb0418

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 山还在那儿 at 2017-10-12 11:21:23
建议：
1.提高样品质量，可用试剂盒或进口试剂盒提取
2.如果采用的是国产的rt-qpcr试剂盒，建议你换成进口的，这样ct值一般会降低

祝好...

谢谢

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no pains,no gains!
5楼2017-10-12 20:59:12
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tiger虎虎虎

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
石蜡 标本我做过，你的ct值太高有可能目的基因浓度 太低，你可以用QIAgen提取试剂盒试一下。
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向着阳光微笑
6楼2017-10-13 08:12:28
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