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鸭鸭酱

新虫 (小有名气)

[求助] 核酸提取后,如何连接小片段产物 已有1人参与

用试剂盒提取木头中微生物的DNA,但产物大小只有20~30bp,请问下如何将这些小片段连接起来?

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jayven

铁杆木虫 (著名写手)

2楼2017-10-10 16:57:06
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-10-11 07:42:49
鸭鸭酱: 金币+20, 有帮助 2017-10-13 11:28:34
重叠PCR,几个片段?大概多长?连成的长片段必须是紧接着的吗?如果不是好办啊,充分利用手头载体的多克隆位点,pcr扩增短片段的时候引入相应的酶切位点,一个一个连不就行了。
及时行乐,人生不留遗憾!
3楼2017-10-10 19:09:13
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鸭鸭酱

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jayven at 2017-10-10 16:57:06
产物大小,意指什么?

意思是提出来的DNA都是20~30bp的片段,不是一条完整的链。

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4楼2017-10-10 23:26:44
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鸭鸭酱

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-10-10 19:09:13
重叠PCR,几个片段?大概多长?连成的长片段必须是紧接着的吗?如果不是好办啊,充分利用手头载体的多克隆位点,pcr扩增短片段的时候引入相应的酶切位点,一个一个连不就行了。

提出来的DNA都是20~30bp的小片段,而我需要扩ITS序列,大小是500~600bp,怎么将这些小片段连起来呢?

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5楼2017-10-10 23:30:01
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晋鹏

版主 (知名作家)

及时行乐,人生不留遗憾!
6楼2017-10-11 01:12:57
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酷莱博

新虫 (小有名气)

额。那就是没提出来。啥玩意那么小

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7楼2017-10-13 13:11:04
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