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鸭鸭酱

新虫 (小有名气)

[求助] 核酸提取后，如何连接小片段产物 已有1人参与

用试剂盒提取木头中微生物的DNA，但产物大小只有20～30bp，请问下如何将这些小片段连接起来？

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1楼 2017-10-10 16:36:16
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jayven

铁杆木虫 (著名写手)
产物大小，意指什么？

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2楼2017-10-10 16:57:06
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-10-11 07:42:49
鸭鸭酱: 金币+20, ★有帮助 2017-10-13 11:28:34
重叠PCR，几个片段？大概多长？连成的长片段必须是紧接着的吗？如果不是好办啊，充分利用手头载体的多克隆位点，pcr扩增短片段的时候引入相应的酶切位点，一个一个连不就行了。
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及时行乐，人生不留遗憾！
3楼2017-10-10 19:09:13
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鸭鸭酱

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jayven at 2017-10-10 16:57:06
产物大小，意指什么？

意思是提出来的DNA都是20～30bp的片段，不是一条完整的链。

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4楼2017-10-10 23:26:44
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鸭鸭酱

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 晋鹏 at 2017-10-10 19:09:13
重叠PCR，几个片段？大概多长？连成的长片段必须是紧接着的吗？如果不是好办啊，充分利用手头载体的多克隆位点，pcr扩增短片段的时候引入相应的酶切位点，一个一个连不就行了。

提出来的DNA都是20～30bp的小片段，而我需要扩ITS序列，大小是500～600bp，怎么将这些小片段连起来呢？

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5楼2017-10-10 23:30:01
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晋鹏

版主 (知名作家)
重叠PCR

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及时行乐，人生不留遗憾！
6楼2017-10-11 01:12:57
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酷莱博

新虫 (小有名气)
额。那就是没提出来。啥玩意那么小

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7楼2017-10-13 13:11:04
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