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甲基化容易发生在什么过程中?转化还是提质粒? 已有3人参与
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各位大神,小仙在构建载体过程中发现nde1和X-ba1切不下来了,T载体,老师说可能发现了甲基化。那么问题就来了,甲基化容易发生在什么过程中呢?转化还是提质粒?如果发生在转化过程中,那么再次划线重提质粒就没有必要了。。。。。。只能重新做转化。看网上有大神说,大肠的感受态细胞分甲基化缺失的和不缺失的,我用的DH5α,也不知道缺不缺失![]() ![]() ![]() ![]() ![]() |
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zhyxin
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Xba1酶切位点容易发生甲基化,DH5α不行 发自小木虫Android客户端 |
2楼2017-09-30 18:48:14
zhyxin
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从DH5α的基因型可以看出(商业化的感受态细胞说明书上都会有),DH5α不是甲基化酶缺陷型,也就是说你转进去的质粒在DH5α体内随细胞增殖而复制的过程中会被甲基化。如果想要制备非甲基化的质粒DNA,可以使用甲基化酶缺陷型大肠杆菌,比如JM110或者HST04 发自小木虫Android客户端 |

5楼2017-10-10 00:40:46
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