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甲基化容易发生在什么过程中？转化还是提质粒？ 已有3人参与
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各位大神，小仙在构建载体过程中发现nde1和X-ba1切不下来了，T载体，老师说可能发现了甲基化。那么问题就来了，甲基化容易发生在什么过程中呢？转化还是提质粒？如果发生在转化过程中，那么再次划线重提质粒就没有必要了。。。。。。只能重新做转化。看网上有大神说，大肠的感受态细胞分甲基化缺失的和不缺失的，我用的DH5α，也不知道缺不缺失  |
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zhyxin
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Xba1酶切位点容易发生甲基化，DH5α不行 发自小木虫Android客户端 |
2楼2017-09-30 18:48:14
zhyxin
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从DH5α的基因型可以看出（商业化的感受态细胞说明书上都会有），DH5α不是甲基化酶缺陷型，也就是说你转进去的质粒在DH5α体内随细胞增殖而复制的过程中会被甲基化。如果想要制备非甲基化的质粒DNA，可以使用甲基化酶缺陷型大肠杆菌，比如JM110或者HST04 发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-10-10 00:40:46
6楼2018-02-27 20:17:00
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7楼2019-11-24 16:20:02