| 查看: 1846 | 回复: 6 | ||||
[交流]
甲基化容易发生在什么过程中？转化还是提质粒？ 已有3人参与
|
各位大神，小仙在构建载体过程中发现nde1和X-ba1切不下来了，T载体，老师说可能发现了甲基化。那么问题就来了，甲基化容易发生在什么过程中呢？转化还是提质粒？如果发生在转化过程中，那么再次划线重提质粒就没有必要了。。。。。。只能重新做转化。看网上有大神说，大肠的感受态细胞分甲基化缺失的和不缺失的，我用的DH5α，也不知道缺不缺失  |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 千淘万漉 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有241人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
zhyxin
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3544.8
- 帖子: 248
- 在线: 112.5小时
- 虫号: 2349502
- 注册: 2013-03-15
- 性别: GG
- 专业: 细胞外基质
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-10-01 09:48:24
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-10-01 09:48:24
|
Xba1酶切位点容易发生甲基化，DH5α不行 发自小木虫Android客户端 |
2楼2017-09-30 18:48:14
zhyxin
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3544.8
- 帖子: 248
- 在线: 112.5小时
- 虫号: 2349502
- 注册: 2013-03-15
- 性别: GG
- 专业: 细胞外基质
3楼2017-09-30 18:51:31
zhyxin
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3544.8
- 帖子: 248
- 在线: 112.5小时
- 虫号: 2349502
- 注册: 2013-03-15
- 性别: GG
- 专业: 细胞外基质
4楼2017-10-01 22:04:53
mengqiang327
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 727.9
- 帖子: 40
- 在线: 58.5小时
- 虫号: 3996849
- 注册: 2015-07-29
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
从DH5α的基因型可以看出（商业化的感受态细胞说明书上都会有），DH5α不是甲基化酶缺陷型，也就是说你转进去的质粒在DH5α体内随细胞增殖而复制的过程中会被甲基化。如果想要制备非甲基化的质粒DNA，可以使用甲基化酶缺陷型大肠杆菌，比如JM110或者HST04 发自小木虫Android客户端 |
5楼2017-10-10 00:40:46
6楼2018-02-27 20:17:00
 本帖仅楼主可见 |
7楼2019-11-24 16:20:02
