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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 重金求助：液相色谱只有一个峰，薄层色谱看应该至少有两种物质，求助大神指点！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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wuzf

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 明月的夜 at 2017-09-28 14:00:42
1. 浓度不够高，从图谱来看，峰高不高，小的峰没有出来。2. 可能是两个峰包在一起，这个要看看峰纯度了。3. 也可能样品没有配置好，杂质和样品没有完全溶解

样品的溶解度没问题，有300克升，样品浓度大约0.01克升，怎么看峰的纯度？

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11楼2017-10-20 18:06:11
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xx小小xx

木虫 (著名写手)
不说清楚样品信息可没法帮你分析问题
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12楼2017-10-20 23:09:30
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ly2199

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

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wuzf: 金币+50, ★★★很有帮助 2017-10-21 16:51:08
（1）从你的薄层板上看确实是两个东西，但是这两个东西的含量是一个比较多，另外一个少
（2）你的HPLC结果的纵坐标确实不太高，你可以加大进样量看看，我觉得18-19min是一个小峰，但这个不一定是你说的第二峰，也可能是个更小的杂质
（3）你的HPLC梯度洗脱的终止条件需要改变一下。在20min后，你可以再加上一个10min，梯度到乙腈80%。这样才能知道20min后面是不是还有峰。
        

           一般HPLC用紫外多检测器的时候梯度的终点都会是有机相比例比较高，这样可以更好的冲洗出样品中的位置。
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13楼2017-10-21 08:51:34
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柳絮虫

新虫 (职业作家)
引用回帖:
10楼: Originally posted by wuzf at 2017-10-20 18:01:34
怎么能弄到30分钟以后呢
...

调整流动相比例，添加水相，保留时间会向后移动。或者，换个柱子。
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14楼2017-10-21 09:42:08
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wuzf

木虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by ly2199 at 2017-10-21 08:51:34
（1）从你的薄层板上看确实是两个东西，但是这两个东西的含量是一个比较多，另外一个少
（2）你的HPLC结果的纵坐标确实不太高，你可以加大进样量看看，我觉得18-19min是一个小峰，但这个不一定是你说的第二峰，也可 ...

纵坐标的高低是由样品进样量还是浓度决定的，一般多大合适？
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15楼2017-10-21 16:49:48
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ly2199

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

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wuzf: 金币+50, ★★★★★最佳答案 2017-10-24 10:05:03
引用回帖:
15楼: Originally posted by wuzf at 2017-10-21 16:49:48
纵坐标的高低是由样品进样量还是浓度决定的，一般多大合适？...

纵坐标高低和你的进样量以及浓度都有关系，在相同浓度的情况下，进样量大，HPLC面积也大，即纵坐标会变高。
如果HPLC的进样量例如25ul，但是你改变样品浓度，那么面积和峰高也会变大。
紫外的纵坐标一般几百或者1000左右都可以的。太高的话也不好，容易造成色谱柱过载

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16楼2017-10-23 08:23:10
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wuzf

木虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by ly2199 at 2017-10-23 08:23:10
纵坐标高低和你的进样量以及浓度都有关系，在相同浓度的情况下，进样量大，HPLC面积也大，即纵坐标会变高。
如果HPLC的进样量例如25ul，但是你改变样品浓度，那么面积和峰高也会变大。
紫外的纵坐标一般几百或者10 ...

谢谢啦，有不懂的再向您请教！
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17楼2017-10-24 10:05:27
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baiyunkuchu

金虫 (小有名气)
很明显两个峰嘛，峰高太低，一般主峰高度在五六百合适。进样浓度加大，19min就是你的另一个峰。

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万丈红尘三杯酒，千秋大业一壶茶！
18楼2018-05-13 10:11:49
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