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wuzf

木虫 (正式写手)

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[求助] 重金求助：液相色谱只有一个峰，薄层色谱看应该至少有两种物质，求助大神指点！已有1人参与

用的岛津LC-20A，色谱柱C18，150*4.6。检测波长598nm。流动相条件A：5mM/L 磷酸二氢铵+5mM/L 磷酸氢二铵水溶液，流动相B:100%乙腈，梯度洗脱（A/B 90/10）到（80/20），梯度时间20min。
液相色谱只有一个峰，见附图；但是从薄层色谱上看至少含有两个不同的物质，求助:液相色谱出的一个峰是否为正常的峰形?怎么从色谱图中得出最佳的分离条件？

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1楼2017-09-27 15:39:05

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ly2199

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【答案】应助回帖

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wuzf: 金币+50, ★★★很有帮助 2017-10-21 16:51:08

（1）从你的薄层板上看确实是两个东西，但是这两个东西的含量是一个比较多，另外一个少
（2）你的HPLC结果的纵坐标确实不太高，你可以加大进样量看看，我觉得18-19min是一个小峰，但这个不一定是你说的第二峰，也可能是个更小的杂质
（3）你的HPLC梯度洗脱的终止条件需要改变一下。在20min后，你可以再加上一个10min，梯度到乙腈80%。这样才能知道20min后面是不是还有峰。

一般HPLC用紫外多检测器的时候梯度的终点都会是有机相比例比较高，这样可以更好的冲洗出样品中的位置。