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wuhao4850103

银虫 (著名写手)

[交流] 蛋白酶解以后的多肽溶液保存在4℃有没有影响

本人最近在用胰蛋白酶对组蛋白进行水解,水解后的多肽溶液当时放置在4℃冰箱中一段时间,后来经过脱盐处理,进行液相色谱-质谱分析。想请问,水解后的多肽溶液放置在4℃环境中,对多肽本身会产生什么样的影响,对后续的液相色谱-质谱鉴定会有影响吗?
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嘻嘻哈哈
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多肽纳米药物

新虫 (初入文坛)

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wuhao4850103: 金币+10 2017-09-27 13:37:19
引用回帖:
3楼: Originally posted by wuhao4850103 at 2017-09-25 19:13:20
加了三氟乙酸,以终止蛋白酶的酶解反应,三氟乙酸的终浓度是0.2%...

这种操作方法,会导致多肽本身降解非常快 ,保存的话 ,还是需要放在-20度 干粉保存
4楼2017-09-27 10:11:56
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

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wuhao4850103: 金币+10 2017-09-25 19:11:59
放4度之前有否进行酶的灭活处理呢?如果处理了问题不大

发自小木虫Android客户端
2楼2017-09-25 08:04:14
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wuhao4850103

银虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2017-09-25 08:04:14
放4度之前有否进行酶的灭活处理呢?如果处理了问题不大

加了三氟乙酸,以终止蛋白酶的酶解反应,三氟乙酸的终浓度是0.2%
嘻嘻哈哈
3楼2017-09-25 19:13:20
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soarshining

捐助贵宾 (著名写手)

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wuhao4850103: 金币+10 2017-10-09 15:38:09
不知道三氟乙酸这个浓度足够终止酶活性没。能直接90℃煮个5分钟吗,或者用变性剂之类的。另外是否无菌或者加了抑菌剂?这也可能影响结果,我纯蛋白有一次就意外的染菌经历。
5楼2017-10-08 23:18:01
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