24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 956  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

galaxy_6

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于克隆

用已经确定含有目的片段的菌(经过克隆然后测序正确后扩大培养的菌)进行克隆,提取质粒后,进行PCR扩增,为什么不能扩增出目的片段出来呢?

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

法式小面包

铜虫 (小有名气)

菌放时间长了质粒可能会降解,也有可能是你PCR试剂的问题

发自小木虫Android客户端
4楼2017-09-20 09:10:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

紫陌骚年的爱

新虫 (初入文坛)

提取质粒作为模板,浓度要在10ng/ul 左右。请问,你稀释了吗?

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-09-20 08:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

galaxy_6

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 紫陌骚年的爱 at 2017-09-20 08:16:58
提取质粒作为模板,浓度要在10ng/ul 左右。请问,你稀释了吗?

我们是加了1μ的模板,总体系是25μ,浓度应该没有问题,因为有个师姐也是这样扩增的。就有结果,我们的不同就在于所用的菌的培养时间不同,我的是以前的,她的是新摇的

发自小木虫Android客户端
3楼2017-09-20 09:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

galaxy_6

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 法式小面包 at 2017-09-20 09:10:39
菌放时间长了质粒可能会降解,也有可能是你PCR试剂的问题

试剂不会有问题吧,因为我和那个师姐用的是同样的试剂

发自小木虫Android客户端
5楼2017-09-20 09:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +5 Amber00 2026-03-31 5/250 2026-03-31 22:43 by zhengzhi8909
[考研] 一志愿北京科技大学材料学硕328分求调剂 +4 1段时间 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:56 by wxiongid
[论文投稿] chinese chemical letters英文版投稿求助 130+4 Yishengeryi 2026-03-30 4/200 2026-03-31 19:52 by babero
[考研] 化学308分调剂 +11 你好明天你好 2026-03-30 12/600 2026-03-31 19:14 by 杨金金金
[考研] 336材料求调剂 +10 陈滢莹 2026-03-26 12/600 2026-03-31 17:59 by jp9609
[考研] 285求调剂 +3 FZAC123 2026-03-30 3/150 2026-03-31 17:49 by 热情沙漠
[考研] 求调剂 +9 akdhjs 2026-03-31 10/500 2026-03-31 17:14 by zhyzzh
[考研] 270求调剂 +3 小杰pp 2026-03-31 4/200 2026-03-31 12:59 by wxiongid
[考博] 材料专业申博 +5 杜雨婷dyt 2026-03-29 5/250 2026-03-31 11:19 by oooqiao
[考研] 求调剂 +4 研s. 2026-03-25 4/200 2026-03-31 10:05 by fmesaito
[考研] 一志愿中海洋320化学工程与技术学硕求调剂 +8 披星河 2026-03-30 8/400 2026-03-31 08:53 by lbsjt
[考研] 英一数一408,总分284,二战真诚求调剂 +3 12.27 2026-03-30 5/250 2026-03-31 00:47 by 不吃芒果17
[考研] 本科211总分289,08工学真心求调剂 +3 utopiaE 2026-03-30 3/150 2026-03-30 23:42 by ms629
[有机交流] 考研调剂 +8 watb 2026-03-26 8/400 2026-03-30 18:40 by 544594351
[考研] 085600,材料与化工321分求调剂 +10 大馋小子 2026-03-28 10/500 2026-03-29 23:35 by 飞行日记西
[考研] 291求调剂 +5 Y-cap 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:18 by mumin1990
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +7 AZMK 2026-03-28 11/550 2026-03-28 21:01 by xxxsssccc
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
信息提示
请填处理意见