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化学小杨

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞培养已有3人参与

复苏细胞,都死了,是怎么回事啊

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shgnsw

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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有可能是冻存的时候没冻存好,也有可能复苏的时候没处理好
2楼2017-09-19 12:56:04
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化学小杨

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by shgnsw at 2017-09-19 12:56:04
有可能是冻存的时候没冻存好,也有可能复苏的时候没处理好

复苏细胞有什么特殊技巧吗,我就是用37℃水浴锅溶解,然后放入大离心管加入培养液离心,然后弃去上层液体,细胞加入培养液放入培养瓶,37℃,二氧化碳5%培养

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3楼2017-09-19 14:33:03
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shgnsw

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 化学小杨 at 2017-09-19 14:33:03
复苏细胞有什么特殊技巧吗,我就是用37℃水浴锅溶解,然后放入大离心管加入培养液离心,然后弃去上层液体,细胞加入培养液放入培养瓶,37℃,二氧化碳5%培养
...

慢冻速溶,其实也没有什么特殊的技巧,复苏起来后可以不离心直接转移到新瓶里面加8-10ml完全培养基,第二天换液试试
6楼2017-09-19 17:36:34
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simple__plan

木虫 (著名写手)

-20度放的时间要短。
7楼2017-09-20 14:29:17
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化学小杨

新虫 (初入文坛)

找到原因啦,是因为培养液中血清含量太少啦,提高血清比例,细胞状态特别好

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10楼2017-09-20 21:05:49
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fengduyanyu

新虫 (正式写手)

4楼2017-09-19 14:36:49
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化学小杨

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by fengduyanyu at 2017-09-19 14:36:49
冻时候都死的。

培养液中血清少会不会有影响啊

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5楼2017-09-19 15:32:48
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zht930528

木虫 (正式写手)

麻辣王子

重新下细胞。各种原因不定哪里有问题
麻辣王子不爱做实验
8楼2017-09-20 16:44:22
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vmp651312

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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请问你是怎么冻的?
9楼2017-09-20 17:14:46
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