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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 细胞培养
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化学小杨

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞培养 已有3人参与

复苏细胞，都死了，是怎么回事啊

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1楼 2017-09-19 11:49:33
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shgnsw

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有可能是冻存的时候没冻存好，也有可能复苏的时候没处理好
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2楼2017-09-19 12:56:04
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化学小杨

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shgnsw at 2017-09-19 12:56:04
有可能是冻存的时候没冻存好，也有可能复苏的时候没处理好

复苏细胞有什么特殊技巧吗，我就是用37℃水浴锅溶解，然后放入大离心管加入培养液离心，然后弃去上层液体，细胞加入培养液放入培养瓶，37℃，二氧化碳5%培养

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3楼2017-09-19 14:33:03
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shgnsw

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 化学小杨 at 2017-09-19 14:33:03
复苏细胞有什么特殊技巧吗，我就是用37℃水浴锅溶解，然后放入大离心管加入培养液离心，然后弃去上层液体，细胞加入培养液放入培养瓶，37℃，二氧化碳5%培养
...

慢冻速溶，其实也没有什么特殊的技巧，复苏起来后可以不离心直接转移到新瓶里面加8-10ml完全培养基，第二天换液试试
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6楼2017-09-19 17:36:34
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simple__plan

木虫 (著名写手)
-20度放的时间要短。
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7楼2017-09-20 14:29:17
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化学小杨

新虫 (初入文坛)
找到原因啦，是因为培养液中血清含量太少啦，提高血清比例，细胞状态特别好

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10楼2017-09-20 21:05:49
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普通回帖

fengduyanyu

新虫 (正式写手)
冻时候都死的。

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4楼2017-09-19 14:36:49
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化学小杨

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fengduyanyu at 2017-09-19 14:36:49
冻时候都死的。

培养液中血清少会不会有影响啊

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5楼2017-09-19 15:32:48
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zht930528

木虫 (正式写手)

麻辣王子
重新下细胞。各种原因不定哪里有问题
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麻辣王子不爱做实验
8楼2017-09-20 16:44:22
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vmp651312

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请问你是怎么冻的？
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9楼2017-09-20 17:14:46
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