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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR时Mg离子怎样定量最合适
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liaoyongqiang

银虫 (正式写手)

[交流] PCR时Mg离子怎样定量最合适

请问大家在做PCR时，缓冲液里边不带有Mg离子，Mg离子是分开附带的。体系是20ul，那么加多少Mg离子为最合适？向各位请教，小弟万分感谢！
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认真做学术，开心生活。
1楼 2009-02-15 18:56:36
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mimisikai

金虫 (小有名气)
通常给的都是通用的，常规的，若你想找到最合适的条件，就多设计梯度实验下
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4楼2009-02-15 22:38:55
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
★
liaoyongqiang(金币+1,VIP+0):哦！谢谢 2-15 19:42
最适合的浓度应该是通过试验摸索获得的，基本上它应该介于1 mM到5 mM之间。最常用的比例是MgCl2浓度1.5 mM(以上均指终浓度)
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会当凌绝顶，一览众山小
2楼2009-02-15 19:38:10
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
有些酶需要2.5mM，有些是1.5mM
其实，买那些配套好的酶和buffer（含Mg2+）直接用就好了~~
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3楼2009-02-15 20:43:25
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
终浓度在2mM左右先试试。
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5楼2009-02-16 09:03:54
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