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liaoyongqiang

银虫 (正式写手)

[交流] PCR时Mg离子怎样定量最合适

请问大家在做PCR时,缓冲液里边不带有Mg离子,Mg离子是分开附带的。体系是20ul,那么加多少Mg离子为最合适?向各位请教,小弟万分感谢!
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认真做学术,开心生活。
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

★
liaoyongqiang(金币+1,VIP+0):哦!谢谢 2-15 19:42
最适合的浓度应该是通过试验摸索获得的,基本上它应该介于1 mM到5 mM之间。最常用的比例是MgCl2浓度1.5 mM(以上均指终浓度)
会当凌绝顶,一览众山小
2楼2009-02-15 19:38:10
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

有些酶需要2.5mM,有些是1.5mM
其实,买那些配套好的酶和buffer(含Mg2+)直接用就好了~~
3楼2009-02-15 20:43:25
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mimisikai

金虫 (小有名气)

通常给的都是通用的,常规的,若你想找到最合适的条件,就多设计梯度实验下
4楼2009-02-15 22:38:55
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)

终浓度在2mM左右先试试。
5楼2009-02-16 09:03:54
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