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bycxlike

新虫 (初入文坛)

[求助] 进样后压力增高,出现肩峰 已有4人参与

岛津色谱,流动相磷酸二氢钾:甲醇34:66,进了三针血清样本后柱压上升,13.1-13.7-14.0,后来稳定在14.0,再进混标,压力也上升了0.2,发现保留时间2点儿几的时候出现一个很高的峰,且开始出现肩峰,加了保护柱的,考虑是不是样本污染了柱子,后来用大比例水冲,换大比例甲醇小流速过夜,第二天进混标依然没有改善,现在我该怎么办?第一张是六个标准品混合,之前标准品最早出峰的时间是3点儿几,第二张是三针样本,我现在该怎么冲柱子呀?

进样后压力增高,出现肩峰


进样后压力增高,出现肩峰-1


@鸭绿江畔 @superyeast @wyy080214 @学术巨星 @klicking 发自小木虫IOS客户端
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bycxlike

新虫 (初入文坛)

第一张是样本,第二张是混标

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2楼2017-09-17 20:22:30
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bycxlike

新虫 (初入文坛)

3楼2017-09-17 20:23:02
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
观察重复性,重复性好的前提下,压力只要稳定,就可以实验。如果一定要恢复到原来压力,建议大比例水相,较高柱温大流速冲洗试试,但时间不要太长。

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4楼2017-09-17 20:39:16
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bycxlike

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wyy080214 at 2017-09-17 20:39:16
观察重复性,重复性好的前提下,压力只要稳定,就可以实验。如果一定要恢复到原来压力,建议大比例水相,较高柱温大流速冲洗试试,但时间不要太长。

老师,出现肩峰了还能进样么?且感觉是有污染物

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5楼2017-09-17 20:49:43
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by bycxlike at 2017-09-17 20:49:43
老师,出现肩峰了还能进样么?且感觉是有污染物
...

那就先清洗,然后再确定,我记得好像清洗生物样品用的是四氢呋喃,效果很不错,你网上查查具体使用规范。别把色谱柱搞坏了。

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6楼2017-09-17 21:41:30
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雪萸

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议先清洗保护住、管路,然后用大比例水冲,最后换小比例水冲洗,应该是有污染物,污染了
7楼2017-09-18 09:22:21
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zq9032

铁虫 (初入文坛)

预柱,柱芯换了 重新充柱子 先低流速,再高流速 色谱柱不要连接检测器了
8楼2017-09-18 16:27:56
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小小鸟mekind

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

血清样本属于复杂样品,成分在色谱柱上保留窗口很窄,建议用梯度洗脱,A流动相采用水加0.1%三氟乙酸,B乙腈加0.1%三氟乙酸,梯度条件从2%B到100%B,时间30min,该条件也可以用于清洗C18柱
9楼2017-09-24 20:44:09
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kitten1983aw

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

进样之前先过0.22um滤膜,如果加了保护柱的话,看看保护柱的压力是否升高了?有可能是保护柱的原因。
10楼2017-10-09 16:54:51
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