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longfeng

金虫 (小有名气)

[交流] 求:半定量PCR方法

那位大侠,给传一下半定量PCR的具体步骤,谢谢!
xueshui0393@163.com
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):谢谢参与! 2-15 19:54
养细胞
提RNA,测浓度,调节每一组的浓度为一致
逆转录
PCR
电泳
搞定
最重要就是摸循环数
我习惯随便拿点细胞提RNA,测浓度,然后取1ul逆转录,然后PCR
PCR的时候,到达一定循环数拿出其中一管,其余继续跑,到下一个循环到,拿出多一管……依此类推,一般摸20、22、24……30个循环
找到能够看见条带的循环,然后以后做实验就用当量的RNA做实验,用这么多循环数
2楼2009-02-15 16:16:36
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