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Klutzl铁杆木虫 (职业作家)
小喵
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[求助]
求助，大鼠皮肤石蜡切片
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最近在做SD大鼠皮肤和肌肉的石蜡切片，实验步骤如下： 1、组织于40g/L多聚甲醛中固定过夜后，流水冲组织以去除固定液。 2、乙醇梯度脱水：70%，80%，90%乙醇脱水30min，95%，100%乙醇脱水20min，各两次； 3、透明：二甲苯：乙醇=1:1透明15min，二甲苯I透明15min，二甲苯II透明15min； 4、浸蜡：二甲苯：石蜡=1:1浸蜡20min，石蜡I浸蜡1h，石蜡II浸蜡1h，石蜡III浸蜡1h； 5、包埋后于4度冰箱保存 6、切片 出现的问题有： 1、在进行切片的时候，发现皮肤组织要么会碎，要么组织部分是空的，偶尔有皮肤组织是完整的，但是在水中铺展的时候发现皮肤组织会散开，想知道是什么原因造成的。 2、如何判断皮肤组织已经完全透明。 3、皮肤组织固定多长时间才比较合适 4、肌肉组织和皮肤组织的包埋步骤是一样的，但是肌肉组织的切片是没有问题，不知道是哪个步骤造成皮肤组织会破碎。  |
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厉娜
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可能是没固定好 延长固定时间，另外，你的浸蜡时间太长了，一般浸蜡，两级就好，组织浸蜡时间过长，切片时候组织容易碎，浸蜡一级半小时，二级一个半小时你可以试试，我没切过皮肤，切的内脏 发自小木虫Android客户端 |
2楼2017-09-15 18:29:40
Klutzl
铁杆木虫 (职业作家)
小喵
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5楼2017-10-20 14:50:50
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