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菜鸟灬求学

新虫 (初入文坛)

[交流] ELISA方法学验证 已有2人参与

小弟应届本科一枚,有幸在上海某生物医药公司研发部负责质量分析。最近在用Cyguns的CHO残留检测试剂盒做HCP验证。奈何样品中残留较低,而试剂盒是定量试剂盒,要求做线性、准确度、精密度等验证。根据样品不同稀释倍数来做线性与范围就很窄,如果样品加标,那线性又该如何评价?菜鸟求上进,诚恳请教。

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xiangcx

新虫 (小有名气)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kk1424: 金币+10, 版块额外奖励,欢迎多多应助交流。 2017-09-07 16:48:21
定量试剂盒是市售的吧?如果是,那如果样品不在检测范围内,结果是不可靠的,你测了也没用,没有说服力啊,如果是超出检测上限可以将样品做不同稀释度去检测,选取OD在标曲范围内且稀释度最低的点进行定量计算。希望对你有帮助。

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生活不止苟且和金钱,还有自然和远方。
2楼2017-09-07 16:31:30
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菜鸟灬求学

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiangcx at 2017-09-07 16:31:30
定量试剂盒是市售的吧?如果是,那如果样品不在检测范围内,结果是不可靠的,你测了也没用,没有说服力啊,如果是超出检测上限可以将样品做不同稀释度去检测,选取OD在标曲范围内且稀释度最低的点进行定量计算。希望 ...

谢谢你的指导 我没懂的是不稀释的样品都在标曲的靠下部分了。如果就样品稀释至不同浓度做线性与范围岂不是很窄?

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3楼2017-09-07 18:30:30
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xiangcx

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 菜鸟灬求学 at 2017-09-07 11:30:30
谢谢你的指导 我没懂的是不稀释的样品都在标曲的靠下部分了。如果就样品稀释至不同浓度做线性与范围岂不是很窄?
...

这不一定啊,看你样品的初始浓度或者说理论值或者经验值做参考,如果浓度拿不准可以做不同稀释度,但稀释倍数跨度大一点,比方说10倍比稀释或者5倍比稀释,多稀释几个浓度这样不管你样品浓度高低总有能落入标曲线性范围的点。不知道这样是否能解决你的问题。

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4楼2017-09-08 07:10:00
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xiangcx

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiangcx at 2017-09-08 00:10:00
这不一定啊,看你样品的初始浓度或者说理论值或者经验值做参考,如果浓度拿不准可以做不同稀释度,但稀释倍数跨度大一点,比方说10倍比稀释或者5倍比稀释,多稀释几个浓度这样不管你样品浓度高低总有能落入标曲线性 ...

还有你说样品要稀释做线性范围我不太明白什么意思,为什么样品需要做线性?

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5楼2017-09-08 07:14:30
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feiguyuan

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般是做样本等倍稀释后,下一个浓度比上上一个浓度,百分比为线性。回收率是根据标曲高中低三种浓度分别添加到标曲中,回算后,减去加标前浓度,即为回收率。可以参考《全面解析中华仓鼠卵巢细胞(CHO)宿主蛋白(HCP),G3残留检测试剂盒》,cellgenebio,一个公司网址推文
6楼2025-12-29 10:43:43
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feiguyuan

新虫 (初入文坛)

有一篇文章讲的比较全面,可以看看,《全面解析中华仓鼠卵巢细胞(CHO)宿主蛋白(HCP),G3残留检测试剂盒》
7楼2025-12-29 10:44:56
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