24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2578  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

好学的虫虫!

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒转化rosetta后长出来呈糊状一层菌,不是单菌落,怎么回事?在线等。

我用质粒转rosetta,30分钟冰上,1分30秒金属浴,3分钟冰上,加300ul kan培养基,摇50分钟,涂kan平板,37度培养12小时后长出来一层模糊的菌。开学后rosetta重新制作,kan重新配,平板重新配,和之前的结果一样样的,怀疑质粒有问题,用之前做成功的质粒转化,发现长板的情况也是一层模糊的菌不是单菌落。是不是kan失效了?因为重新配的这两次kan用的是同一个小瓶中的,保质期到2020年,师妹用这个kan的液体培养基养菌提蛋白,跑胶是目的条带,但是我还是怀疑这个kan有问题,想问问大家有没有出现过这种情况?

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

199006287956

木虫 (著名写手)

之前遇到这个事情,是因为质粒的问题,我是无意中用了同尾酶,导致自怜,菌长的多还糊

发自小木虫Android客户端
追求不惜,奋斗不息
3楼2017-09-07 11:00:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

好学的虫虫!

新虫 (初入文坛)

大家帮忙看看,我已经在换kan了,如果是它的原因的话,会第一时间上传结果。

发自小木虫Android客户端
2楼2017-09-07 10:40:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

其实也不是很懂,帮你查了下。rosetta的感受态应该自带的是氯霉素吧,是不是应该涂CM板,而不是KAN板。当然也有可能是你转的质粒上带kan,这样的情况,可以试试涂无抗板,以及用无抗LB培养一会,通常低于12小时,然后再转入kan平板,说不定就好了,有可能是表达效率低下导致的菌落形态改变。我猜是这样,当然也不见得对,因为没做过rosetta,希望能帮到你。
4楼2017-09-07 16:51:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

其实我的意思就是先无抗,让它先长起来,然后再涂板,类似增菌过程
5楼2017-09-07 16:52:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料科学与工程求调剂 +6 深V宿舍吧 2026-03-29 6/300 2026-03-29 20:51 by 唐沐儿
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-24 6/300 2026-03-29 20:45 by 无际的草原
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +4 幸运的三木 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:49 by Miko19
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-03-26 6/300 2026-03-29 01:11 by hanserlol
[考研] 生物学学硕,一志愿湖南大学,初试成绩338 +6 YYYYYNNNNN 2026-03-26 7/350 2026-03-28 20:52 by 唐沐儿
[考研] 085404求调剂,总分309,本科经历较为丰富 +4 来财aa 2026-03-25 4/200 2026-03-28 07:41 by 棒棒球手
[考研] 265求调剂 +8 小木虫085600 2026-03-27 8/400 2026-03-27 22:16 by 无际的草原
[考研] 085600,材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 化学308分求调剂 +8 你好明天你好 2026-03-23 9/450 2026-03-27 14:01 by 杨光于青云
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 351求调剂 +4 麦克阿磊 2026-03-24 4/200 2026-03-27 00:32 by wxiongid
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 材料/农业专业,07/08开头均可,过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪!?!
信息提示
请填处理意见