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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 用HPLC分析一样品中的问题
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小毛虫8358

金虫 (小有名气)

[交流] 用HPLC分析一样品中的问题

大家好！
     我最近用HPLC检测一样品，该样品在THF溶剂中易溶，但在甲醇和乙腈中都是嶶溶的，我分别用三种流动相体系来检测该样品：
（1）乙腈：0.1%磷酸=90：10
（2）甲醇：0.1%磷酸=90：10
（3）甲醇：THF：0.1%磷酸=75：20：5
这个样品只能用THF来溶解，这时问题就出来了，用（1）（2）两种流动相是，峰形是那种很粗的，而且吸收强度不是很大，很浓的样品吸收信号值才400毫伏的样子，而且溶剂吸收峰也非常强，一般都在100-200毫伏的样子。用（3）中流动相可以解决峰形，但是这个溶剂吸收峰也很强啊，也在100-200毫伏。
我想请教各位虫友有什么办法可以将这个溶剂吸收峰给去掉啊？
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1楼 2009-02-13 08:55:17
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jiamingw

金虫 (小有名气)
★
jsys(金币+1):感谢应助!
出现这种情况和溶解度有关系，检测方法没有说检测波长，一般化合物都有两个最大吸收，应该可以避开四氢呋喃的最大吸收，如果对图谱要求不是很高，可以根据扣除空白做检测。另外梯度洗脱可以试试有机溶剂30％开始起始，如果出峰不是太早也可以再提高有机溶剂的比例。
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5楼2009-02-13 16:55:59
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dreamsnow200428

木虫 (小有名气)
★
jsys(金币+1,VIP+0):感谢应助！ 2-13 09:21
这个条件确定的话只能改变检测波长降低溶剂吸收了，溶剂截止波长：乙腈 190nm
甲醇 205nm THF 212nm。
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2楼2009-02-13 09:04:59
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jixf_1114

金虫 (正式写手)
★
jsys(金币+1):感谢应助!
THF在开封后要尽快使用，时间长了之后会氧化掉产生有强紫外吸收的物质
另外使用流动相来溶解样品，或者减少进样量
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-02-13 10:43:42
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songzf1981

木虫 (正式写手)
★
jsys(金币+1):感谢应助!
楼主有没有测过样品的最大紫外吸收？波长设定合适否？
赞一下(1人) 回复此楼
海到尽头天作岸，山登绝顶我为峰。
4楼2009-02-13 13:04:06
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