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小毛虫8358

金虫 (小有名气)

[交流] 用HPLC分析一样品中的问题

大家好!
     我最近用HPLC检测一样品,该样品在THF溶剂中易溶,但在甲醇和乙腈中都是嶶溶的,我分别用三种流动相体系来检测该样品:
(1)乙腈:0.1%磷酸=90:10
(2)甲醇:0.1%磷酸=90:10
(3)甲醇:THF:0.1%磷酸=75:20:5
这个样品只能用THF来溶解,这时问题就出来了,用(1)(2)两种流动相是,峰形是那种很粗的,而且吸收强度不是很大,很浓的样品吸收信号值才400毫伏的样子,而且溶剂吸收峰也非常强,一般都在100-200毫伏的样子。用(3)中流动相可以解决峰形,但是这个溶剂吸收峰也很强啊,也在100-200毫伏。
我想请教各位虫友有什么办法可以将这个溶剂吸收峰给去掉啊?
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dreamsnow200428

木虫 (小有名气)



jsys(金币+1,VIP+0):感谢应助! 2-13 09:21
这个条件确定的话只能改变检测波长降低溶剂吸收了,溶剂截止波长:乙腈 190nm
甲醇 205nm THF 212nm。
2楼2009-02-13 09:04:59
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jixf_1114

金虫 (正式写手)


jsys(金币+1):感谢应助!
THF在开封后要尽快使用,时间长了之后会氧化掉产生有强紫外吸收的物质
另外使用流动相来溶解样品,或者减少进样量
3楼2009-02-13 10:43:42
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songzf1981

木虫 (正式写手)


jsys(金币+1):感谢应助!
楼主有没有测过样品的最大紫外吸收?波长设定合适否?
海到尽头天作岸,山登绝顶我为峰。
4楼2009-02-13 13:04:06
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jiamingw

金虫 (小有名气)


jsys(金币+1):感谢应助!
出现这种情况和溶解度有关系,检测方法没有说检测波长,一般化合物都有两个最大吸收,应该可以避开四氢呋喃的最大吸收,如果对图谱要求不是很高,可以根据扣除空白做检测。另外梯度洗脱可以试试有机溶剂30%开始起始,如果出峰不是太早也可以再提高有机溶剂的比例。
5楼2009-02-13 16:55:59
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uliya809

木虫 (正式写手)


jsys(金币+1):感谢应助!
减少甲醇的浓度!
6楼2009-02-13 19:03:21
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小毛虫8358

金虫 (小有名气)

在此,谢谢各位!!
7楼2009-02-14 08:10:43
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ddb0224

新虫 (初入文坛)

太好了,楼主发表的太好了,问题解决了嘛!我用DMF溶解时也出现相同的问题,也一样解决嘛!
8楼2009-02-15 10:17:00
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