[求助] 知道了目的基因片段序列，怎么设计带有酶切位点的引物

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1楼2017-09-06 09:51:38

x8m8q8

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2楼: Originally posted by 不吃M的鱼 at 2017-09-06 10:46:31
引物5'端加酶切位点，酶切位点前再加几个保护碱基

那提取的基因组DNA是用作PCR反应体系中的DNA模板吗？还有大肠杆菌质粒DNA的提取的目的是用作什么？

3楼2017-09-06 11:46:41

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不吃M的鱼

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引物5'端加酶切位点，酶切位点前再加几个保护碱基

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x8m8q8

2楼2017-09-06 10:46:31

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你的实验目的是把你的基因构建到载体上吧？那你的基因组就是你的PCR模板，扩增目的片段的。至于大肠杆菌DNA，我估计你是说的构建质粒的载体吧，就是把你目的片段连接到你抽提的质粒上面的。

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4楼2017-09-06 13:21:13

x8m8q8

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4楼: Originally posted by 不吃M的鱼 at 2017-09-06 13:21:13
你的实验目的是把你的基因构建到载体上吧？那你的基因组就是你的PCR模板，扩增目的片段的。至于大肠杆菌DNA，我估计你是说的构建质粒的载体吧，就是把你目的片段连接到你抽提的质粒上面的。
...

哦哦，好的，非常感谢

5楼2017-09-06 15:37:23